甘菊DFL基因对光周期的反应及调控作用研究

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LFY基因在植物花发育花过程中具有重要的作用,作为花分生组织决定基因,不仅决定着花由花序分生组织向花分生组织的转变,超表达可以使植物的花期提前。另外,LFY的表达受光周期和GA调控,也受自主促进途径基因调控。此外,LFY具有激活花器官基因活性的重要作用。因此,研究LFY同源基因及其诱导其它基因的表达变化对于阐明植物成花机理及通过调控基因的表达途径来调控植物花期具有重要的意义。  根据LFY基因的下游基因AP1同源基因的结构特点设计兼并引物,获得甘菊AP1同源片段,然后根据获得已知的序列,设计特异性引物,通过RT-PCR和RT-PCR基础上的‘RACE’法获得了甘菊中AP1同源基因DAP1。该基因cDNA全长为1029 bp,包含了一个完整的ORF框,编码237个氨基酸和一个终止密码子。其推测的氨基酸序列与拟南芥和烟草的同源性分别为53%和65%。氨基酸序列中包含MADS-box结构和植物特异性结构K-box保守结构域,与典型的MADS-box基因的结构相符,氨基酸序列C末端具有“MPPWMV”结构,是AP1/FUL-like亚家族enAP1进化系的典型结构。  对甘菊进行光照处理,利用实时荧光定量PCR对短日诱导后甘菊中LFY同源基因DFL及其下游基因DAP1的表达量变化进行了研究。显著性分析结果表明DFL基因在处理后的第4d,表达量急速上升,达到第一个高峰,之后开始缓慢下降,但在处理后10d时,其表达量又开始升高,在处理后16d,达到第二高峰。DAP1基因处理后的第4d,表达量急速上升,达到第一个高峰,之后开始迅速下降,一直维持在较低水平。根据DFL基因和DAP1基因表达量的变化,推测DFL基因在甘菊成花的发育过程中对DAP1基因起调控作用。
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