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组织工程学是近十年发展起来的新兴学科,它是应用细胞生物学和工程学的原理,研究和开发具有生命的生物替代物,用来修复和重建人体组织和功能的一门新兴科学。其基本方法是,体外分离、培养种子细胞,使其适度增殖、分化,然后将其接种到具有一定形态和空间结构的三维支架材料上,形成具有特殊形态和功能的组织和器官,以达到修复创伤和重建功能的目的。 骨缺损修复一直是临床治疗的难点问题之一,骨组织工程学的研究发展为临床骨缺损修复和功能重建提供了新的思路。本研究以免骨髓基质细胞(bone marrow stromal cell,BMSC)作为种子细胞,研究其体外培养条件下的生物学特性,探讨了重组人骨形成蛋白—2(recombinanthuman bone morphogenetiC protein-2,rhBMP-2)、地塞米松(Dex)单独和联合作用对BMSC的增殖和分化的生物学作用;同时以珊瑚为支架材料,形成BMSC/珊瑚复合人工骨,钛网加强修复兔自体下颌骨缺损,BMSC/珊瑚复合人工骨钛板固定修复自体股骨缺损,观察骨修复情况,初步探讨了钛支架在组织工程方法修复骨缺损中的作用。 实验方法:取新西兰兔骨髓,分离BMSC,体外培养,经诱导分化为骨髓基质成骨细胞(MSO),采用细胞形态学观察、生长曲线测定、扫描电镜(SEM)、碱性磷酸酶(ALP)染色、钙染色等方法观察BMSC的生物学特性;采用ALP测定、MTT法检测、考马斯亮蓝法探讨rhBMP-2和Dex对BMSC的生物学作用;采用大体观察、SEM、组织学染色、骨磨片 窜四旱匠大学项士学位论文 等方法评价新骨形成情况。 结果:BMSC可以在体外适宜条件下培养,经诱导可向成骨细胞转化; rhBMP-2和Dex在一定条件下,可促进BMSC的增殖和向成骨细胞转化; 钛金属加强的BMSC/珊瑚复合骨在修复自体下颔骨缺损及股骨缺损的过 程中成骨作用明显,随时间延长,成骨量增加且更加成熟。 结论:BMSC取材方便、损伤小、倍增迅速、可定向分化,可以作为 骨组织工程的种子细胞:fhBMPZ和 DCX对BMSC具有促增殖和定向诱 导分化作用:钛金属加强的8*sC/珊瑚在修复骨缺损的过程中成骨活跃, 显示出良好的应用前景。