麻醉大鼠停通气缺氧模型和缺氧预处理模型的建立

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第一部分麻醉大鼠停通气缺氧损伤模型的建立目的:通过观察机械通气麻醉大鼠不同时间停通气后死亡率、脑电生理、神经功能和脑组织形态学等的变化,建立适合脑缺氧研究的停通气缺氧损伤模型.方法:雄性Wistar大鼠144只,体重260~290g,随机分为对照组和停通气组(根据停通气时间分为停通气1、2、3、4、5、6、7分钟组),共8组,每组18只.水合氯醛腹腔麻醉后行气管插管和机械通气,应用肌松药消除大鼠自主呼吸,以断开呼吸机接头的方式进行停通气,各组到达相应预定的时间后立即恢复通气,并根据血压情况进行心肺复苏,同时记录TCA(循环停止时间:从开始停通气至MAP<25mmHg的时间)和TROSC(自主循环恢复时间:从开始复苏至SBP≥60mmHg的时间),如开始复苏3分钟后自主循环仍未恢复则放弃抢救,复苏成功者继续呼吸机支持60分钟,全程记录脑电图(EEG)变化.实验后继续观察3天,记录各组大鼠死亡率和复苏后24、48和72小时神经功能评分(NDS),72小时后每组选取3只存活大鼠在光镜和电镜下观察海马CA1区结构改变.结论:综合评价各组大鼠死亡率、神经功能评分、神经组织细胞超微结构和脑电生理改变,我们认为停通气4分钟组适合作为脑缺氧损伤动物模型.第二部分麻醉大鼠停通气缺氧预处理模型的建立目的:探讨麻醉大鼠停通气缺氧预处理模型的合适时间组合.方法:雄性Wistar大鼠66只,分别按照停通气1或2分钟,恢复通气1、2、3、5或10分钟,组合出10种停通气缺氧预处理方案:1min-1min组、1min-2min组、1min-3min组、1min-5 min组和1min-10min组、2min-1min组、2min-2min组、2min-3 min组、2min-5 min组、2min-10 min组,同时设置对照组,每组6只.水合氯醛腹腔麻醉后行气管插管和机械通气,预处理各组按方案连续进行4次预处理,对照组不进行预处理,随后各组均停通气4分钟,复苏和复苏后处理同第一部分实验.记录各组大鼠死亡率,进一步比较TCA、TROSC、复苏后24、48和72小时NDS评分和海马CA1区超微结构情况.
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