滁菊组织培养脱病毒技术与脱毒苗的应用研究

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本文对侵染滁菊[Dendranthema morifolium(Ramat) Tzvel ’chuju’]的病毒种类进行了鉴定,并采用改良热处理结合茎尖分生组织培养的方法,初步建立了滁菊组培脱毒快繁技术体系和高产栽培技术体系,获得主要结果如下: 1.经过指示植物鉴定、体外抗性测定、血清学测定(ELISA)和电子显微镜观察,鉴定出侵染滁菊的病毒质粒主要是番茄不孕病毒(TAV)、马铃薯X病毒(PVX)、马铃薯Y病毒(PVY)和黄瓜花叶病毒(CMV)。 2.经过试验,筛选出滁菊芽增殖的最佳培养基为MS+1.0mg/L 6-BA +0.1mg/L NAA;生根的最佳培养基为1/2MS(大量元素减半)+0.1mg/L NAA。配制上述培养基时添加的蔗糖为30g/L,琼脂为6.5g/L,PH值调整为5.6。培养室条件为温度25±1℃、光照周期14h/d、光照强度25001x。 3.改良后的热处理方法是:把生根后的试管苗连瓶放入光照培养箱中,温度采用阶段升温法,即32℃×2d、34℃×2d、36℃×2d、38℃×42d,光照周期为14h/d,光照强度为25001x。试管苗热处理48d后即可剥离较大茎尖(0.5-0.8mm)接种进行脱毒培养,脱毒率>83%,茎尖成活率>42%。 4.开展了脱毒苗的田间试验,总结出了脱毒苗的高产栽培技术。滁菊经脱除病毒后,种性恢复,长势强壮,在生长期无病毒病发生,产量比未脱毒苗增加35%以上。通过与加工企业合作,采取“科研+农户+公司”的模式进行了脱毒苗的示范和推广,年栽培面积已经超过100ha,为农户增加收入120万元以上。
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