心叶喜林芋组织培养及离体再生体系研究

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本研究为建立高效稳定的心叶喜林芋(Philodendron gloriosum)离体再生体系,以心叶喜林芋茎段、叶片为外植体,对心叶喜林芋的组织培养及植株再生进行了系统的研究,初步探讨了植物生长调节剂、基本培养基、碳源、取材季节和不同浓度的AgNO3、GA3等对心叶喜林芋离体再生的影响。结果表明:(1)心叶喜林芋组织培养中,茎段灭菌最佳消毒时间为0.1%的HgCl2处理9min。(2)外植体最适宜的取材季节是春季,尤其是4月份,在这一时期取材,外植体茎段萌芽率最高,且污染率、褐变率较低。(3)基本培养基对茎段芽萌发具有显著影响,MS为心叶喜林芋芽萌发的最佳基本培养基。(4)在本试验所选碳源中,较适宜心叶喜林芋外植体生长的碳源是蔗糖,其次为葡萄糖,麦芽糖的效果相对较差。(5)暗培养时间对外植体愈伤组织的诱导无显著影响。(6)6-BA浓度和生长素种类对心叶喜林芋茎段芽萌发具有极显著影响,生长素浓度对茎段芽萌发无显著影响。6-BA浓度以3.0 mg/L为佳,在生长素种类中,NAA对茎段芽萌发效果最好,IBA次之,再次为IAA,生长素浓度在0.05-0.2mg/L间均较好。茎段芽萌发最佳培养基为:MS+6-BA3.0 mg/L+NAA0.1 mg/L,萌芽率可达88.86%。(7)适宜于叶片愈伤组织诱导的培养基是:MS+6-BA1.0 mg/L+NAA0.5 mg/L+2,4-D 0.05 mg/L;愈伤组织分化不定芽的最佳培养基为:MS+KT3.0 mg/L+NAA0.2 mg/L和MS+KT2.0 mg/L+NAA0.1 mg/L。(8)细胞分裂素种类和浓度对芽增殖均具有极显著影响,在6-BA、KT、TDZ三种细胞分裂素中,4.0mg/L 6-BA最有利于芽的增殖;NAA浓度对芽增殖具有显著影响,其最适浓度为0.2 mg/L。芽增殖的最适培养基为:MS+6-BA4.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L。(9)AgNO3对心叶喜林芋增殖具有明显影响,当浓度为3.0 mg/L时效果最好,平均增殖倍数为2.10。GA3对芽的增殖有抑制作用,随着GA3浓度的增加,增殖有效芽数趋减,且芽苗质量差,不利于继代。(10)生长素种类对无菌苗壮苗具有极显著影响,生长素浓度对无菌小苗壮苗具有显著影响,6-BA浓度对无菌小苗壮苗无显著影响,最适宜于无菌苗伸长生长的培养基组合为:MS+6-BA1.5 mg/L+NAA0.5 mg/L;而最有利于无菌苗新叶发生的培养基配方为:MS+6-BA1.5 mg/L+IBA1.0 mg/L。(11)心叶喜林芋无菌小苗生根较易,但在不同的生根培养基中,根的数量和质量有明显差异,综合考虑生根率、生根条数和根质量,以1/2MS+NAA0.1 mg/L+IBA0.2 mg/L+AC 0.1%最佳,平均生根率100%,平均生根条数7.33条。(12)在珍珠岩:蛭石:河沙=1:1:2的基质中移栽成活率最高,达到92.5%。
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