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目前,对广大妇女同胞而言,卵巢癌正在严重威胁着其生命的健康,对广大女性造成身体的痛苦及精神上的困扰。卵巢癌是一种恶性生物学活性较高的恶性肿瘤,在多种妇科恶性肿瘤中其发病率低于子宫颈癌及子宫内膜癌,位居第三位,但由于卵巢癌患者早期未能表现出典型症状,而卵巢的解剖学位置居于盆腔深部,对卵巢癌的早期病例又缺乏有效的诊断方法,所以约70%的卵巢癌患者临床确诊时已到临床晚期,导致其死亡率高居妇科恶性肿瘤中第一位。近年来,尽管经过有效的肿瘤细胞减灭术以及规范的放化疗方案的应用,其5年生存率仍维持在30%左右,而且统计学显示卵巢癌发病率有逐年增高的趋势,发病年龄表现为日趋年轻化。在妇科恶性肿瘤领域的研究中,卵巢癌已成为一种被广大科研者高度重视的恶性肿瘤,卵巢癌分类中多数病例来源于卵巢的上皮组织,约占90%。目前,尽管经过无数专家及学者持之以恒的研究,仍未清楚研究出有关卵巢上皮性癌的发病机制及发病原因,所以寻找并发现卵巢癌的发病机制,探讨其可能的发病原因,对于其早期诊断,指导临床治疗具有重要意义。Wnt信号通路在胚胎的发育过程中以及成体组织及器官的维持中均起重要作用,多种人类恶性肿瘤中该通路均存在异常激活。分泌型卷曲蛋白5(SFRP5)是一种能对Wnt/β-catenin信号传导通路产生抑制作用的拮抗因子,该通路的抑制可能与其蛋白表达的下调或失活有关。以往有研究证明,部分基因高甲基化状态存在于启动子区5’端CpG岛,这一机制可能是引起基因表达下调或失活的机制之一。目前在乳腺癌、宫颈癌、结肠癌以及胃癌等恶性肿瘤中,已有SFRP5基因启动子甲基化导致该基因沉默的报道。本研究用甲基化特异性PCR(MSP)法检测40例卵巢上皮性癌组(A组)、20例交界性卵巢肿瘤组(B组)以及20例正常卵巢组(C组)中SFRP5基因启动子的甲基化状态,用免疫组织化学(SP)法检测SFRP5蛋白和Wnt-1蛋白的表达情况,并分析三者之间的关系。目的研究SFRP5基因启动子在卵巢上皮性癌的甲基化状态,分析其蛋白表达以及下游Wnt-1蛋白表达三者之间的相关性,探讨在卵巢上皮性癌的发生过程中SFRP5基因启动子甲基化可能致癌的机制。材料与方法1研究标本40例卵巢癌组(A组)(其中包括21例浆液性囊腺癌,12例黏液性囊腺癌,7例子宫内膜样癌)、20例交界性卵巢肿瘤组(B组)以及20例正常卵巢上皮组(C组)均来源于郑州大学第三附属医院妇科(2009年6月～2012年3月)的手术患者,所用标本均为石蜡包埋后组织,全部标本有病理医师复核。3组患者年龄25～67岁(中位年龄48岁),所有癌症患者术前未经放疗、化疗以及免疫治疗。2研究方法MSP法检测三组中SFRP5基因启动子的甲基化状态；用SP法分别检测三组中SFRP5蛋白和Wnt-1蛋白的表达情况。3统计方法实验结果应用SPSS17.0统计软件进行分析,其中计数资料采用χ2检验进行分析；相关性分析采用pearson列联系数分析。显著性水准a=0.05。结果1.MSP法检测SFRP5基因甲基化状态40例卵巢上皮性癌(A组)组织中甲基化频率为67.5%；交界性卵巢上皮性肿瘤组织(B组)中甲基化频率为10%；20例正常卵巢上皮组织(C组)中甲基化频率为0%,经统计学分析(χ2=34.239,P<0.001),差异具有统计学的意义。分组两两比较,交界性肿瘤组与正常卵巢上皮组比较,差异无统计学意义(P>0.0167),其余两组相比,差异有统计学意义(P<0.0167)。2.SP法检测SFRP5蛋白表达情况A组、B组、C三组中Sfrp5蛋白阳性表达率分别为20%(8/40)、55%(11/20)、90%(18/20),经统计学分析(x2=20.102,P<0.001),差异具有统计学意义。分组两两比较,差异均有统计学意义(P<0.0167)。3.SP法检测Wnt-1蛋白表达情况A组、B组、C三组中Wnt-1蛋白阳性表达率为85%(34/40)、55%(11/20)、15%(3/20),经统计学分析(x2=27.500,P<0.001),差异具有统计学意义。分组两两比较,差异均有统计学意义(P<0.0167)。4. SFRP5基因甲基化频率及其蛋白表达均与卵巢上皮性癌的病理类型有关(x2=14.711,P<0.001；x2=12.059,P<0.001),浆液性癌组中甲基化率及其蛋白阴性表达分别与黏液性癌组相比,以及子宫内膜样癌相比,差异均有统计学意义(P<0.0167)；黏液性癌组与子宫内膜样癌组两组相比较,差异无统计学意义(P>0.0167)。卵巢上皮性癌中SFRP5基因甲基化频率及其蛋白表达均与病理分级、临床分期、淋巴的转移均无关(P>0.05)。5.在卵巢上皮性癌组织中,SFRP5基因甲基化频率,SFRP5蛋白表达,Wnt-1蛋白表达三者的相关分析SFRP5基因发生甲基化的27例卵巢上皮性癌组织中仅有1例SFRP5蛋白表达阳性,SFRP5基因甲基化与SFRP5蛋白表达呈负相关,(rp=0.506,P<0.05)；SFRP5蛋白表达阳性的8例卵巢上皮性癌组织中仅有3例Wnt-1蛋白表达阳性,SFRP5蛋白表达与Wnt-1蛋白表达呈负相关,(rp=0.554,P<0.05)。结论1. SFRP5基因高甲基化及其蛋白阴性表达,Wnt-1蛋白高表达可能与卵巢上皮性癌的发生有关,具体可能激活Wnt/β-catenin信号传导通路,参与癌症的发生。2. SFRP5基因甲基化及其蛋白表达下降与浆液性卵巢癌病理类型有关。3. SFRP5基因启动子甲基化的发生可能是其蛋白表达下调的主要机制,SFRP5蛋白表达的下调可能引起Wnt-1蛋白过度表达,进而激活Wnt/β-catenin信号传导通路,参与卵巢上皮性癌的发生。