红掌组织培养与植株再生技术的研究

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红掌(Anthurium andraeanum)为天南星科花烛属多年生草本花卉,因其花叶形态奇特,花期持久,常作为切花材料;盆栽品种株型优美,也逐渐受到消费者的青睐,广泛应用于室内花卉的装饰。由于红掌传统的繁殖方法很难满足花卉市场的需求,植物组织培养技术常应用于红掌种苗的大量生产。本研究以4种优良的盆栽红掌新品种为试验材料,对愈伤组织的诱导与分化、试管苗的继代增殖、生根移栽等四个培养阶段的重要影响因素进行了系统地分析,主要取得了以下实验结果:1.红掌初代培养结果表明,在叶片、叶柄、侧芽、花序及佛焰苞片几种材料中,叶片与叶柄的培养效果较好;选取叶片与叶柄作为外植体时,用0.1%HgCl2处理5min灭菌效果较好;取叶片为外植体时,以展叶5-8d、不含主脉的幼嫩叶片为宜,取叶柄为外植体时,以未展开叶、形态学上端的部位为宜;在1/2MS基本培养基、添加抗褐化剂PVP300mg/L的培养基上,能有效降低培养叶片的褐化率;黑暗培养与光照12h/d相比,在叶片和叶柄的褐化率方面未见显著差异,但诱导产生的愈伤组织颜色不同,前者诱导产生黄色愈伤组织,转移至光照培养条件下能够转变为绿色。2.红掌愈伤组织继代培养结果表明,细胞分裂素和生长素浓度组合是影响愈伤组织诱导与分化主要因子。细胞分裂素与2,4-D的互作效应强于NAA、IBA,细胞分裂素ZT、TDZ与2,4-D的组合显著强于6-BA;在附加6-BA2.0mg/L与2,4-D0.2mg/L的培养基上,初代培养虽能诱导形成愈伤组织,但在继代培养过程中褐化现象严重,且未见不定芽的分化,在附加ZT2.0mg/L、TDZ4.0mg/L的培养基上,愈伤组织的生长和分化状态都比较好。3.红掌品种及外植体(叶片、叶柄)不同,愈伤组织的不定芽分化及再生能力存在较大差异。红掌品种SAM、SST的植株再生能力强于SDM、SHG,其中品种SAM、SDM、SHG的叶片再生能力强于叶柄,品种SST的叶柄再生能力强于叶片;品种SAM、SST的叶片与叶柄在1/2MS+TDZ4.0mg/L+2,4-D0.2mg/L培养基上愈伤组织诱导和分化效果最好,品种SDM、SHG叶片愈伤组织诱导与分化适宜的培养基是1/2MS+ZT2.0mg/L+2,4-D0.2mg/L,叶柄只产生愈伤组织,而无不定芽的分化。4.在试管苗继代增殖培养阶段,以2-4芽带愈伤组织为外植体的培养效果较好,繁殖系数可达14.4,株高为2.98cm;在1/2MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.3mg/L或IBA0.3mg/L培养基上,试管苗生长状态良好;随着继代培养次数的增加,试管苗对激素条件的要求有所降低,适当降低蔗糖浓度也不会影响增殖培养效果。5.随着继代次数的增加,试管苗生长势有所下降,使用有机添加物CH100mg/L或者YE50mg/L,有利于促进试管苗的生长。在生根培养阶段,1/2MS+NAA0.1mg/L为适宜的生根培养基,再生小植株生长旺盛。
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