干预CaN信号通路对心房颤动影响的实验研究目的：探讨持续快速心房起搏诱发的心房颤动与钙调神经磷酸酶CaN(CalcineurinA，CaN)表达及激活的关系；探讨CaN特异性抑制剂环抱素A(Cyclosporine A，CsA)对房颤模型犬心房缝隙连接蛋白40/43(Connexin40/43，Cx40/43)重构的影响；探讨CsA干预CaN信号通路对房颤犬心内电生理特性的影响。通过以上研究明确CaN信号通路激活与心房颤动的内在联系，以及干预CaN信号通路激活是否具有抑制房颤作用，为寻找新的房颤治疗靶点提供理论依据。方法：健康杂种犬18只，随机分为对照组、快速起搏组、快速起搏加CsA组。处理方法：①对照组：全麻后，仅切开右颈部皮肤，进行电生理检查，不植入起搏器，简称Sham组。②快速起搏组：全麻后，通过右颈内静脉将起搏器电极植入右心耳，固律型单腔起搏器埋于右颈部皮下，持续起搏(400次/分)8周，简称ATP组(Atrial Tachypacing，ATP)。③CsA组：在快速起搏组处理因素基础上喂食环孢素A(5mg/kg/day)8周。监测各组实验犬一般状况；实验前后行心脏超声观测犬心房面积变化；进行电生理检测：采用穿刺股静脉及右颈内静脉的方法，经穿刺血管放置标测电极，记录并对比各组右房有效不应期(Atrial Effective Refractory Period，AERP)、传导速度(Conduction Velocity，CV)、折返波长(Wave Length，WL)、房颤负荷、频率自适应性等反映心房电生理特性的指标。8周后处死所有实验犬，开胸取材后通过荧光免疫组化染色方法观察心房CnA_β、Cx40、Cx43蛋白表达及分布情况，采用发色底物法检测心房组织CaN活性，应用Western blot蛋白印迹方法对心房Cx40、Cx43、CnA_β表达情况进行半定量分析。结果：(1)超声显示ATP与CsA两组犬的左右心房面积与实验开始时及Sham组比较均有明显增加，LVEF轻度降低，ATP与CsA两组间无显著差异。(2)CnA_β表达及CaN活性变化：持续快速心房起搏导致犬心房CnA_β表达增多、CaN活性增强；CsA可以明显抑制这种改变；(3)Cx40/43表达及分布情况：持续快速起搏导致犬心房Cx40表达明显增多，Cx43表达明显减少，分布呈明显不均一性，端端连接减少，侧侧连接增多。CsA组Cx40/Cx43表达变化趋势与ATP组类似，但程度明显减低，差异有显著性。(4)电生理特性：持续快速起搏导致犬心房AERP缩短，频率适应性下降，房颤的可诱发率明显升高、P波平均时间与AF持续时间延长、折返波长变短、激动传导速度减慢。CsA可一定程度上抑制持续快速起搏所致的心房AERP缩短，但对房颤的可诱发率、持续时间等电生理指标未见明显影响。结论：1．快速心房起搏诱发房颤过程中存在心房CnA_β蛋白的表达增加及CaN活性增强现象，提示CaN信号通路在该过程中是激活的，CaN信号通路参与了持续快速心房起搏所致房颤的发生与维持。2．快速心房起搏可导致犬心房Cx40表达增多、Cx43表达减少；应用CsA可一定程度上抑制这种重构性改变，提示干预CaN信号通路可能对房颤导致的Cx40/43重构过程有抑制作用。3．干预CaN信号通路激活可对持续快速心房起搏犬心房电生理重构产生一定影响，主要表现在能减少AERP缩短程度，但并未使快速心房起搏犬房颤的诱发频率、程度有明显改变。说明单纯干预CaN信号通路激活可能难以表现出房颤抑制作用。