【摘 要】
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目的 应用RT-PCR和DNA印迹杂交技术,检测恶性病变引起胸/腹水脱落细胞中CD44v8-10、SP-A(Surfactant Protein-A)基因的表达,探讨CD44v8-10/CD44v10比值与SP-A基因在胸/腹水诊
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目的 应用RT-PCR和DNA印迹杂交技术,检测恶性病变引起胸/腹水脱落细胞中CD44v8-10、SP-A(Surfactant Protein-A)基因的表达,探讨CD44v8-10/CD44v10比值与SP-A基因在胸/腹水诊断中的临床意义,探讨对原发性肺腺癌引起的恶性胸/腹水组织来源判定、组织学分型的应用价值。 方法 (1) 应用竞争性RT-PCR技术,对良/恶性病变引起胸/腹水中脱落细胞的CD44v8-10和CD44v10基因进行竞争性同步扩增和凝胶图像分析,对CD44v8-10和CD44v10进行半定量分析,计算恶性病变引起胸/腹水脱落细胞的CD44v8-10/CD44v10比值,与良性病变所引起的胸/腹水脱落细胞的CD44v8-10/CD44v10比值进行对比,建立一种通过检测基因表达量来判断病变性质的分子生物学指标;(2) 应用RT-PCR技术,检测胸/腹水细胞中的SP-A基因扩增,经Southern blot验证,判定引起胸/腹水的病变性质、组织来源或组织学类型;(3) 培养肺腺癌细胞(GLC-82),与白细胞配伍成梯度浓度的样本,探求本实验技术对判断恶性病变性质的敏感程度。 结果 (1) 恶性病变导致的胸/腹水CD44v8-10/CD44v10比值均大于1.00(3.62±2.06/3.39±2.36),良性病变引起的胸/腹水CD44v8-10/CD44v10比值均小于1.00(0.48±0.29/0.55±0.50),良/恶性病变CD44v8-10/CD44v10的临界值为1.00,CD44v8-10/CD44v10基因表达量的差异有非常显著性意义(P<0.0001);(2) CD44v8-10/CD44v10应用于胸/腹水细胞学检查时阳性率为91.7%(77/84);胸水中阳性率92.9%(39/42);腹水中阳性率90.5%(38/42);3) SP-A基因检测有助于肿瘤组织起源、组织学分型与原发部位判断,单独应用时阳性率为
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