纤维蛋白粘合剂的制备及其在犬皮肤切口的应用试验

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目前对动物专用纤维蛋白粘合剂的研发与应用的研究很少。本文通过对纤维蛋白粘合剂配方进行优化、改性,得到最佳改性纤维蛋白粘合剂配方;并将最佳改性配方纤维蛋白粘合剂应用于犬皮肤切口试验,对比评估其粘合效果,为进一步研究和开发动物专用纤维蛋白粘合剂提供理论依据。试验研究内容和结果如下:1、纤维蛋白粘合剂的制备:纤维蛋白粘合剂的体外粘接性能指标为:拉伸剪切力、粘接力、固化速度和自溶时间。通过对纤维蛋白粘合剂的基础组分进行单因素的浓度配比优化,得到纤维蛋白粘合剂最佳基础配方为:纤维蛋白原80mg/mL,抑肽酶3000KIU/mL,凝血酶原500IU/mL,无水氯化钙40mmol/mL;最佳基础配方体外粘接性能为:在10min和30min的拉伸剪切力分别达到0.110±0.001kg/cm2与0.140±0.003kg/cm2,粘接力达到0.189±0.002kg/cm2,成胶速度4±2s,胶体于8~9d完全自溶。在此基础上,通过添加化学粘合剂和丝蛋白进行配方改性,采用双因素正交试验方法研究得出体外粘接性能最佳的改性纤维蛋白粘合剂配方。试验结果表明:最佳改性纤维蛋白粘合剂配方为:纤维蛋白原80mg/mL,抑肽酶3000KIU/mL,丝蛋白8.0mg,凝血酶原500IU/mL,无水氯化钙40mmol/mL,化学粘合剂0.1mL;最佳改性纤维蛋白粘合剂配方的体外粘接性能为:在10min和30min的拉伸剪切力达到0.191±0.006kg/cm2与0.234±0.006kg/cm2,粘接力达到0.324±0.007kg/cm2,成胶速度约4s,胶体于10±1d完全自溶。结果表明改性纤维蛋白粘合剂的粘接强度明显优于基础配方纤维蛋白粘合剂。2、改性纤维蛋白粘合剂在犬皮肤切口的应用试验:将改性纤维蛋白粘合剂应用于犬皮肤切口,以常规手术缝合切口为对照进行体内粘接效果对比试验。20只健康犬随机分为缝线组与粘合剂组,分别采用丝线和纤维蛋白粘合剂闭合皮肤切口,观察记录闭合皮肤切口所用时间、切口愈合时间、瘢痕宽度及愈合伤口断裂力测定,在术后2d和8d,观察皮肤切口大体形态学和组织病理学变化,同时测定皮肤切口中的透明质酸(HA)和羟脯氨酸(HYP)含量。结果表明,改性粘合剂粘合皮肤切口所需时间为5±1s,粘合后的皮肤外观平整,无渗出感染现象,局部疼痛反应轻微,创口愈合需8~9d,愈合后的瘢痕宽度为0.03~006mm,伤口断裂力为0.534kg/cm2~0.527kg/cm2。在切口愈合过程中,粘合剂组HA含量在术后2d呈一过性升高,HYP含量在术后2d后持续升高,8d含量达到最高,与缝线组比较差异显著(P<0.05),两种成分变化趋势与组织学变化一致;粘合组除粘接强度低于缝线组外,其余各项指标均显著优于对照组。
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