大肠埃希菌临床分离菌株耐药性及毒力基因分析

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目的①了解青岛市市立医院大肠埃希菌临床分离菌株的分布特征及耐药情况,以指导合理用药;②研究产超广谱β-内酰胺酶(extended spectrum B lactamases, ESBLs)与非产ESBLs大肠埃希菌临床分离菌株耐药性;③分析产ESBLs和非产ESBLs大肠埃希菌临床分离菌株毒力基因表达情况。方法①自2010年10月~2011年8月收集青岛市市立医院大肠埃希菌临床分离菌株共96株,其中46株ESBLs阳性菌,50株ESBLs阴性菌;②采用美国临床实验标准化委员会(the National Committee for Clinical Laboratory Standards, NCCLS)推荐的纸片扩散法(Kirby-Bauer, K-B法)测定产ESBLs和非产ESBLs大肠埃希菌耐药性;③采用聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction, PCR)对大肠埃希菌毒力因子志贺样毒素(VT1)、细胞坏死因子(CNF1、CNF2)、不耐热肠毒素(elt)、耐热肠毒素(est)、a-溶血素(hlyA)、紧密黏附素(eaeA)、束状菌毛(bfpA)进行基因检测,应用统计学方法比较ESBLs阳性与ESBLs阴性菌株基因携带情况。结果①96株大肠埃希菌临床分离菌株主要来源于ICU(12/96,12.5%)、肾内科(12/96,12.5%)及门诊(12/96,12.5%),尿液及痰液中大肠埃希菌的检出率较高(49/96,51.0%、30/96,31.3%)。②临床常用抗菌药物中,大肠埃希菌临床分离菌株对亚胺培南敏感性最高(敏感率为95/96,99.0%),其次为哌拉西林/他唑巴坦(敏感率为88/96,91.6%)和头孢哌酮/舒巴坦(敏感率为87/96,90.6%);大肠埃希菌临床分离菌株耐药率最高的为氨苄青霉素(耐药率为85/96,88.5%),其次为复方新诺明(耐药率为66/96,68.8%)和头孢唑林(耐药率为63/96,65.6%)。③产ESBLs大肠埃希菌对氨苄青霉素、头孢唑林的耐药率高达100%,对头孢他啶、头孢吡肟的耐药率大于90%,耐药率较高的其他药物包括氨曲南(89.1%)、左氧氟沙星(87.0%)、复方新诺明(76.1%)、庆大霉素(73.9%)、氨苄西林舒巴坦(56.5%)等,而耐药率相对较低的药物有头孢哌酮/舒巴坦(4.3%),未发现对亚胺培南和哌拉西林/他唑巴坦耐药;非产ESBLs大肠埃希菌对氨苄青霉素的耐药率为78%,耐药率较高的药物包括左氧氟沙星(64%)、复方新诺明(62%)、庆大霉素(44%)、头孢唑林(34%)、氨苄西林舒巴坦(32%)等,耐药率相对较低的药物有氨曲南(16%)、头孢吡肟(16%)、头孢他啶(12%)、哌拉西林/他唑巴坦(4%)等,未发现对亚胺培南耐药。④产ESBLs大肠埃希菌的多重耐药率为91.3%,CNF2、hlyA、eaeA、VT1、est、bfpA、elt、CNF1的基因检出率分别为6.5%、69.6%、69.6%、89.1%、10.9%、26.1%、8.7%、19.6%;非产ESBLs大肠埃希菌的多重耐药率为62.0%,CNF2、hlA、 eaeA、 VT1、est、bfpA、elt、CNF1的基因检出率分别为16.0%、28.0%、64.0%、38.0%、6.0%、34.0%、10.0%、24.0%。统计学分析表明,产ESBLs大肠埃希菌组和非ESBLs大肠埃希菌组的多重耐药性比较有显著性差异(x2=11.293,P<0.05),且两组的hlyA和VT1检出率也有显著性差异(x2=16.585,x2=26.724,P<0.05)。结论①临床大肠埃希菌感染时,可经验用药首选亚胺培南,其次为哌拉西林/他唑巴坦和头孢哌酮/舒巴坦,然后根据药敏结果结合病情调整用药。②我院产ESBLs大肠埃希菌耐药现象较非产ESBLs大肠埃希菌严重,可能与产ESBLs大肠埃希菌多重耐药率高及某些毒力基因表达率高有关。
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