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本研究的目的是利用牛干扰素-γ（BoIFN-γ）相应单克隆抗体与其噬菌体结合肽来研究其抗病毒活性区段，为干扰素的抗病毒活性机理与构效关系的进一步研究提供了理论依据。本研究将BoIFN-γ基因分为五段进行表达，并将其与本实验室保存的鼠抗BoIFN-γ单克隆抗体3C2、1H4进行结合位点分析，结果表明，3C2与1H4分别特异性结合A1和A3，特异性结合位点分别为第63-66aa即序列NQVI和第1-33aa。同时，本研究建立了检测M13噬菌体ELISA方法，制备了兔抗M13衣壳蛋白抗体，并对抗体进行了纯化与标记，对标记前和标记后纯化产物进行活性测定，将标记后产物进行了Western blot鉴定以及将其应用到验证已知的阳性噬菌体H11、H12、H14、H16、H18中。结果表明，兔抗M13KE多克隆抗体效价高于1:32000，标记后活性高于1:4000，标记抗体与已知阳性噬菌体的ELISA鉴定结果与前期测序结果一致。并将此酶标抗体运用到了进一步的BoIFN-γ结合肽的筛选工作中。以BoIFN-γ蛋白为靶标分子与随机十二肽库进行筛选，经过三轮筛选，产出投入比逐渐升高，第三轮较第一轮提高约7倍，说明目的噬菌体得到了有效的富集。，并对筛选出的噬菌体单克隆其进行了ELISA鉴定、PCR鉴定最终推导出阳性噬菌体的共有序列为WH*H和HKH。经过进一步的竞争抑制性实验，其中分段蛋白A2和A3分别能抑制BoIFN-γ与阳性噬菌体IFN-γ-3、IFN-γ-15的结合，特异性结合位点分别为BoIFN-γ氨基酸序列的第42-46aa即序KKIIQ和第63-66aa即NQVI。BoIFN-γ蛋白具有一定的抗病毒活性，抗VSV病毒的活性为3.1×105U/mg，同时也对BoIFN-γ相应抗体（单抗和多抗）IgG以及阳性噬菌体IFN-γ-3和IFN-γ-15进行了抗病毒活性阻断实验，阻断效果3C2>多抗>1H4，IFN-γ-15>IFN-γ-3。经过抗病毒活性阻断分析可以初步定位牛IFN-γ的活性区段为第1-33aa、第42-46aa即序KKIIQ和第63-66aa即序列NQVI。