糖尿病(Diabetes)是一种代谢性疾病,严重威胁人类健康和生命。糖尿病的发病率及死亡率逐年攀升,这其中95%以上的糖尿病患者是Ⅱ型糖尿病患者(TypeⅡDiabetes Mellitus,T2DM),Ⅱ型糖尿病是由于胰岛素抵抗及胰岛素分泌不足所致,因此又称之为非胰岛素依赖型糖尿病。许多胰岛素抵抗的Ⅱ型糖尿病患者还在采用胰岛素治疗,导致胰岛素用量越来越大,而降糖效果越来越差,促使研究者们不断研发非胰岛素类血糖调节药物。由于非胰岛素类降糖药物并非体内天然存在的生物学活性分子,长期用药会导致多种不良反应,严重限制了该类降糖药物应用。目前治疗T2DM的药物仍以双胍类、磺酰脲类等促进胰岛素分泌的降糖药物为主,但这类药物除了常见的不良反应之外,最突出的缺点是易引发持续性的低血糖,而长期用药会因使胰岛素持续过度分泌引发胰岛β细胞功能的衰竭。除此之外,因为T2DM的传统治疗方式侧重于缓解高血糖症状,治标而不治本,致使多数患者的β细胞数量与功能逐渐降低、血糖调控能力持续下降。因此,研发使用更为安全、疗效更加显著,能够更为有效地控制糖尿病与其多种并发症的新型治疗药物,特别是寻找像天然胰岛素那样的内源性物质或类似物,对血糖的吸收、利用与代谢有调节作用的生物活性分子,成为了当今糖尿病治疗新药研发领域的重点和热点。胰高血糖素样肽-1(Glucagon-like peptide-1,GLP-1)是一种十分重要的肠道内分泌激素,具有改善胰岛素抵抗、降低过高血糖、刺激胰岛β细胞增殖、促进胰岛素分泌、抑制胰高血糖素分泌、延缓胃排空、抑制食欲、保护心血管及神经系统等作用,GLP-1具有理想降糖药物的多种特征,是目前糖尿病治疗药物研发领域倍受瞩目的研究焦点。但因内源性的GLP-1极易被体内的二肽基肽酶-4(DDP-IV)降解从而失活,因此极大地限制GLP-1在临床的应用,所以设法延长GLP-1作用时间是目前的研究重点。本研究是在此基础上,对本实验室研制的用于Ⅱ型糖尿病治疗的基因工程药“长效血糖调节多肽”601-GLP-1制备工艺和药效进行实验研究,得到了以下结果。1.建立了601-GLP-1的中试发酵工艺。通过反复摸索,确定了最适发酵工艺条件,并绘制了发酵曲线。2.建立了独特的601-GLP-1的Ni亲和层析柱上复性工艺。通过摸索Ni柱复性条件,达到较高的复性率和较好的复性效果。3.建立了601-GLP-1纯化工艺。利用此工艺制备出了纯度和内毒素指标合格的601-GLP-1蛋白。4.初步完成了对601-GLP-1的血糖调节药效学研究。通过降糖实验、糖耐量实验和促胰岛素分泌实验证明了601-GLP-1具有比较显著的糖尿病治疗效果。