【摘 要】
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碱性成纤维细胞生长因子（fibroblast growth factor 2,FGF2）是一种成纤维细胞因子超家族中的一员,研究表明FGF2不仅具有神经细胞、组织细胞的修复作用,还对心肌、脑等细胞具有抵御氧化应激的作用。本实验旨在探究FGF2能否通过改善线粒体的功能,以及通过PI3K-AKT1-HIF信号通路来改善有氧糖代谢途径,从而保护氧化应激卵母细胞,提高卵母细胞质量。本实验共分为对照组（0
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碱性成纤维细胞生长因子（fibroblast growth factor 2,FGF2）是一种成纤维细胞因子超家族中的一员,研究表明FGF2不仅具有神经细胞、组织细胞的修复作用,还对心肌、脑等细胞具有抵御氧化应激的作用。本实验旨在探究FGF2能否通过改善线粒体的功能,以及通过PI3K-AKT1-HIF信号通路来改善有氧糖代谢途径,从而保护氧化应激卵母细胞,提高卵母细胞质量。本实验共分为对照组（0 ng/ml FGF2+0μmol/L H2O2）、H2O2组（250μmol/L H2O2+0 ng/ml FGF2）、抗氧化组（150 ng/ml FGF2+250μmol/L H2O2）三组。将收集的卵母细胞分别添加至三组培养液中培养24 h后,对各组细胞氧化应激标志物（ROS、MDA、8-OHd G）以及还原型谷胱甘肽（GSH）进行检测,验证FGF2对卵母细胞的氧化应激的影响;随后对卵母细胞的线粒体功能进行检测（线粒体膜电位、ATP、ADP、AMP、能荷）;最后利用Westernblot和酶联免疫法对细胞中糖代谢通路PI3K-AKT-HIF以及糖代谢途径关键酶的活力进行检测。最终得到如下结果:1.卵母细胞内氧化应激标志物含量比较结果显示:8-OHd G含量,在三组间差异显著（P＜0.05）;ROS含量,H2O2组显著高于抗氧化组和对照组（P＜0.05）,抗氧化组和对照组间差异不显著（P＞0.05）;MDA含量,在三组间差异显著（P＜0.05）。2.卵母细胞内GSH水平:在三组之间差异显著（P＜0.05）。3.细胞内线粒体膜电位及能荷水平:三组之间差异显著（P＜0.05）。4.PI3KCa磷酸化水平,三组间差异显著（P＜0.05）;另外,AKT表达量,H2O2组显著低于其他两组（P＜0.05）,抗氧化组和对照组间没有差异（P＞0.05）。5.FGF2对卵母细胞糖代谢酶活性的影响:对照组与抗氧化组的HK、6-PFK、PK酶活力均显著低于H2O2组,而PDK1结果则恰恰相反（P＜0.05）。抗氧化组6-PFK、PDK1酶活性均恢复至正常水平（P＞0.05）,HK、PK酶活性仍显著低于对照组水平（P＜0.05）。6.H2O2组HIF含量显著高于对照组（P＜0.05）,抗氧化组显著低于H2O2组（P＜0.05）,对照组与抗氧化组之间差异不显著（P＞0.05）。结论:FGF2通过提高GSH的水平,减少氧化应激的产生,提高线粒体功能,使小鼠卵母细胞免受氧化应激的影响;而且通过修复PI3K/AKT-HIF通路,降低无氧酵解途径（EMP）酶的活力,促进糖有氧代谢途径（TCA）酶的活力,从而提高卵母细胞的质量。
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