三氯乙烯致皮肤角质形成细胞损伤及维生素E、银杏叶提取物保护作用的体外研究

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三氯乙烯(trichloroethylene,TCE)是常用的有机溶剂,主要用于金属去污、脱脂和干洗等。工人在操作中皮肤直接接触TCE引起的损害,在包括中国在内的发展中国家很普遍,已引起职业卫生界的广泛关注。但其皮肤损害作用的具体机制和有效的保护措施研究不够,限制了TCE引起的职业性皮肤损伤防治工作的开展。皮肤角质形成细胞(keratinocyte,KC)是人体表皮屏障的主要构成细胞,其在皮肤与外源性化合物接触中首当其冲。角质形成细胞的损伤与多种皮肤疾病的发生与发展相关。因此,研究TCE对皮肤角质形成细胞损伤及其有效的保护因素,可为进一步了解TCE对皮肤损害作用及其机制,并为TCE皮肤损害的防治提供参考依据。本研究利用体外无血清培养的正常人角质形成细胞测试系统,采用细胞、分子毒理学方法,研究TCE致角质形成细胞膜损伤、细胞氧化应激,NO和NOS活力及NOS mRNA表达水平、细胞亚微结构和细胞凋亡等指标的改变,探索TCE引起刺激性接触性皮炎的发病机制及其抗氧化剂维生素E(VitE,α—生育酚)和银杏叶提取物(ginkgo biloba leaf extracts,EGb)拮抗TCE细胞毒性作用。 目的 研究常用有机溶剂TCE对体外培养的人皮肤角质形成细胞的细胞毒性,探讨TCE致角质形成细胞损伤机制;并观察抗氧化剂Vit E和EGb对TCE所致的角质形成细胞损伤的保护作用。 方法 用胰蛋白酶经冷和温两步消化法分离人正常皮肤的角质形成细胞,进行体外无血清培养。将来自3个以上不同个体的角质形成细胞混合,在加与不加抗氧化剂维生素E或银杏叶提取物情况下,分别用中性红吸附试验(NRU)测定TCE的NR50
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