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目的:基于促放射性肺纤维化生成的关键介质Th1/Th2,探讨桑杏护肺颗粒干预放射线致大鼠肺纤维化药效学作用机理。方法:采用体重200±20g的SD雄性大鼠384只随机分为空白组、模型组、强的松组、桑杏护肺颗粒高、中、低剂量组,每组64只。除空白组外,其余各组均采用直线加速器6MV-X线单次全胸照射14GY,造成放射性肺纤维化模型。桑杏护肺颗粒各组及强的松组的剂量按人体剂量换算成大鼠等效剂量给药,强的松组按3.125mg/kg/d的标准灌服强的松水溶液,中药高中低剂量分别为:45g/kg/d、22.5g/kg/d、11.25g/kg/d,造模后24h给予对应药物;空白组与模型组,按10ml/d的标准灌服生理盐水;各组分别于第4、8、12、16、20、24、28、32周随机抽取8只大鼠,进行心尖采血,处死并收集肺组织、肺泡灌洗液。HE、Masson染色法评价肺组织肺泡炎及肺纤维化程度;酶联免疫法(ELISA法)检测血清IL-6、TNF-α、SOD、MDA含量;免疫组化法检测肺组织TGF-β1及α-SMA表达;酶联免疫法(ELISA法)检测两组血清中Th1相关细胞因子IL-12、IFN-γ含量以及Th2相关细胞因子IL-4、IL-5、IL-13含量;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测两组肺组织中Th1相关细胞因子IL-12、IFN-γm RNA的表达以及Th2相关细胞因子IL-4、IL-5、IL-13m RNA表达;流式细胞术(FCM)检测肺泡灌洗液Th1/Th2细胞比值。结果:1.肺损伤发展过程:射线照射16w后,模型组受照射大鼠开始出现肺纤维化表现;24w后,肺组织以纤维化病变为主;32w后,肺纤维化病变进一步加重弥漫性肺纤维化形成,提示14Gy单次全胸照射,可成功制备大鼠放射性肺损伤及后期肺纤维化大鼠模型,且肺纤维化发生时间与临床表现相似。2.病理形态:空白组大鼠肺组织结构清晰,未见明显形态学改变;与空白组相比,模型组以及各用药组大鼠的肺泡结构均有不同程度的破坏,有炎性细胞浸润以及胶原纤维增生。HE染色,各给药组与模型组相比,肺泡炎及肺纤维化程度均有明显改善,有统计学意义(p<0.05);与强的松组相比,第4周、8周、12周、16周桑杏护肺颗粒各剂量组具有统计学意义(p<0.05),第20、24、28、32周桑杏护肺颗粒各剂量组无统计学意义(p>0.05)。Masson染色,与模型组比较,各给药组的肺纤维化程度从第16周开始均有显著改善(p<0.05),与强的松组相比,第16周桑杏护肺颗粒各剂量组具有统计学意义(p<0.05),第20、24、28、32周桑杏护肺颗粒各剂量组无统计学意义(p>0.05);桑杏护肺颗粒各剂量组之间比较无统计学意义(p>0.05)。3.IL-6、TNF-α、SOD、MDA、TGF-β1、α-SMA的表达:与空白组比较,模型组大鼠血清中IL-6、TNF-α、MDA及肺组织TGF-β1、α-SMA含量均显著升高(p<0.05),SOD活性显著降低(p<0.05)。与模型组比较,强的松组和桑杏护肺颗粒各剂量组大鼠IL-6、TNF-α、SOD、MDA、TGF-β1、α-SMA含量有统计学意义(p<0.05)。与强的松组相比,16周前桑杏护肺颗粒各剂量组具有统计学意义(p<0.05),第20、24、28、32周桑杏护肺颗粒各剂量组无统计学意义(p>0.05)。桑杏护肺颗粒各剂量组之间比较无统计学意义(p>0.05)。4.IL-12、IFN-γ、IL-4、IL-5、IL-13的含量:与空白组比较,模型组大鼠血清IL-12、IFN-γ含量显著降低(p<0.05),IL-4、IL-5、IL-13的含量显著升高(p<0.05)。与模型组比较,强的松组和桑杏护肺颗粒各剂量组血清IL-12、IFN-γ含量显著升高(p<0.05),IL-4、IL-5、IL-13含量显著降低(p<0.05)。与强的松组相比,第12周、16周桑杏护肺颗粒各剂量组具有统计学意义(p<0.05),第20、24、28、32周桑杏护肺颗粒各剂量组无统计学意义(p>0.05)。桑杏护肺颗粒各剂量组之间比较无统计学意义(p>0.05)。5.IL-12、IFN-γ、IL-4、IL-5、IL-13m RNA的表达:与空白组比较,模型组大鼠肺组织IL-12、IFN-γm RNA表达显著降低(p<0.05),IL-4、IL-5、IL-13m RNA的表达显著升高(p<0.05)。与模型组比较,强的松组和桑杏护肺颗粒各剂量组肺组织IL-12、IFN-γm RNA表达显著升高(p<0.05),IL-4、IL-5、IL-13m RNA表达显著降低(p<0.05)。与强的松组相比,第12周、16周桑杏护肺颗粒各剂量组具有统计学意义(p<0.05),第20、24、28、32周桑杏护肺颗粒各剂量组无统计学意义(p>0.05)。桑杏护肺颗粒各剂量组之间比较无统计学意义(p>0.05)。6.Th1/Th2比值:与空白组比较,模型组大鼠肺泡灌洗液Th1/Th2细胞比值显著降低(p<0.05)。与模型组比较,强的松组和桑杏护肺颗粒各剂量组肺泡灌洗液Th1/Th2细胞比值显著升高(p<0.05)。与强的松组相比,第12周、16周桑杏护肺颗粒各剂量组具有统计学意义(p<0.05),第20、24、28、32周桑杏护肺颗粒各剂量组无统计学意义(p>0.05)。桑杏护肺颗粒各剂量组之间比较无统计学意义(p>0.05)。结论:1.桑杏护肺颗粒能够减轻放射性肺纤维化大鼠的肺泡炎及肺纤维化程度;2.桑杏护肺颗粒能够降低放射行肺纤维化大鼠IL-6、TNF-α、MDA、TGF-β1的含量,升高SOD活性,降低α-SMA含量,这可能是其发挥干预放射性肺纤维化作用的机理之一;3.放射性肺纤维化的发生与Th1表达受抑制及Th2的过度表达密切相关,Th1/Th2失衡是促放射性肺纤维化发生的关键介质;4.桑杏护肺颗粒能够上调Th1及相关细胞因子IL-12、IFN-γ的表达并下调Th2及相关细胞因子IL-4、IL-5、IL-13的过度表达,桑杏护肺颗粒能够调控放射性肺纤维化Th1、Th2平衡,这可能是其干预放射性肺纤维化的关键作用机理。