高脂血症对牙周炎影响的动物实验研究

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目的:近年来的临床研究表明,牙周疾病与心血管疾病之间有着密切的联系,脂代谢紊乱是引起心脑血管疾病病理改变的重要危险因素之一。本研究通过建立Apo-E-/-小鼠高血脂模型及实验性牙周炎模型,观察小鼠牙周组织及炎症因子的变化,探讨高脂血症对小鼠牙周炎的影响。方法:1.动物分组与建模:本实验分两组,A组:单纯牙周炎组,18只Apo-E+/+小鼠;B组:牙周炎+高脂血症组,18只Apo-E-/-小鼠。两组均经高脂饮食喂养4W,成功建立了B组为高血脂动物模型,A组血脂水平无明显变化。两组均用浸有Pg的5/0医用丝线结扎小鼠左侧上颌第二磨牙建立牙周炎模型。2.实验室检测:牙周结扎第1、3、5W时行以下检测:两组各随机选取6只小鼠,行眼底静脉丛取血,用ELISA法检测炎症因子IL-6和CRP;小鼠牙周组织检查:用Mazza法检测龈沟出血指数(Sulcus Bleeding Index),根分叉病变程度(Furcation Involvement);行以上检测后处死小鼠取左侧上颌第二磨牙牙体及牙周复合组织,循环内固定,外固定,行显微CT扫描、重建、测量牙槽骨丧失值、牙槽骨矿物质密度。3.统计学分析:采用SPSS 12.0统计软件进行t检验,以P<0.05为差异有统计学意义。结果:1.高血脂模型:高血脂建模第4W时B组的HDL-C、LDL-C、TC、TG均高于A组,具有统计学意义(p<0.05);2.牙周组织检查:龈沟出血指数(Sulcus Bleeding Index):牙周结扎第1W时,A、B两组间无明显差异,第3、5W时B组明显严重于A组,两组相比具有统计学意义(P<0.05);根分叉病变程度(Furcation Involvement):牙周结扎第1W时,两组小鼠均无根分叉病变,根分叉病变指数为0;第3W时出现根分叉病变,但两组差别不明显,不具有统计学意义,第5W时B组根分叉病变加剧较严重,与A组相比具有统计学意义(P<0.05)。3.IL-6.CRP水平含量比较:IL-6:牙周结扎第3W时B组的IL-6含量为37.89±2.13 pg/ml,显著高于A组30.78±3.45 pg/ml.牙周结扎第5W时B组的IL-6含量为43.62±3.13 pg/ml,显著高于A组35.63±3.20 pg/ml,具有统计学意义(p<0.05);CRP:牙周结扎第5W时B组的CRP含量为0.69±0.04 ng/ml,显著高于A组O.46±0.02 ng/ml,具有统计学意义(p<0.05)。4.Micro-CT测量:牙槽骨丧失水平:在牙周结扎第1W时, B组牙槽骨丧失较A组多,在第3、5W时,两组差异渐增大,尤其是第5W时进一步加重,牙槽骨呈三维方向吸收,部分标本牙槽骨吸收近根尖,三个时间点两组比较均具有统计学意义,P<0.05。牙槽骨矿物质密度值相比较,在结扎后1w,两组间无明显差异,测量参数相比较无统计学意义,在3、5W时A、B两组差异显著,具有统计学意义,P<0.05。结论:1.Apo-E-/-小鼠高脂饮食喂养4W,成功建成高血脂模型,Apo-E+/+血脂水平变化不明显,说明本实验所选取的动物复合实验要求,并为实验的下一步进行提供了参考价值。2.伴有高脂血症的牙周炎小鼠其炎症因子与牙周检查情况均严重于仅有牙周炎者,这提示了较高的血脂水平在牙周炎的发病机制中可能具有重要作用。3.Micro-CT检查结果提示,较高的血脂水平加剧了牙周炎牙槽骨丧失及牙槽骨矿物质密度变低,导致牙槽骨骨质疏松,这说明较高的血脂水平可能加重牙周炎牙槽骨的吸收。
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