蛭弧菌在球等鞭金藻培养中的应用研究

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球等鞭金藻是一类营养极为丰富的微型藻类,含有大量的蛋白质、不饱和脂肪酸、糖类和维生素等营养物质,是海洋鱼、虾、贝类经济动物的优质开口饵料。但由于球等鞭金藻生长条件较为温和,没有极端的温度、盐度和酸碱度要求,在培养及分离、纯化过程中容易被细菌污染,致使藻细胞老化,影响藻的生长,甚至造成水产养殖动物的病害。因此,研究一种简便易行、安全性高的控制、减少球等鞭金藻养殖水体中细菌的方法十分必要,这对于球等鞭金藻的大规模培养及水产养殖业的健康发展都具有重要意义。蛭弧菌具有寄生、裂解进而消除其它细菌的作用,在控制细菌方面有很广泛的应用前景。本实验从球等鞭金藻培养基配方的优化入手,在智能光照培养箱培养的基础上,将球等鞭金藻扩展到室内开放式大桶中培养,并通过在藻液中定期添加不同浓度的蛭弧菌BD-DLL菌液,研究蛭弧菌对球等鞭金藻培养中的细菌及弧菌的控制消除效果。同时,通过测定藻的各项生长指标及水质指标,研究蛭弧菌对球等鞭金藻生长的影响。实验获得的优化培养基配方为:NaNO3,30mg/L;CO(NH22,30mg/L; NaHCO3,400mg/L;KH2PO4,8mg/L;FeC6H5O7,0.5mg/L;VB1,200ug/L;VB12,1.0ug/L,人工海水配制。蛭弧菌的应用研究结果显示,在球等鞭金藻培养水体中添加不同浓度的蛭弧菌后,与对照组相比,蛭弧菌高、低浓度组在前24h内均可以有效控制养殖水体及附着在藻体上的总异养细菌数和弧菌数(p<0.05),其中,当蛭弧菌的投放浓度达到103pfu/ml时控制效果更佳,在添加蛭弧菌后48h时总异养细菌数和弧菌数都能降低3-4个数量级。实验期间各实验组中蛭弧菌的浓度先迅速升高,达到最大值后逐渐下降,在投放72h后,蛭弧菌对总异养细菌和弧菌的控制效果开始降低。球等鞭金藻培养液中添加蛭弧菌后,与对照组相比,实验组中的藻经历较短的延滞期就提前进入对数生长期,在藻的生长前期(前6天),蛭弧菌添加组中藻的生长速率与对照组相比明显偏高(p<0.05),但蛭弧菌对球等鞭金藻整个生长期的生长速率并无明显影响(p>0.05)。蛭弧菌添加组与对照组相比,藻的稳定期相对较长,当蛭弧菌的添加浓度为103pfu/ml时效果更明显。蛭弧菌对球等鞭金藻的生物量也具有一定影响,其中,蛭弧菌低浓度组A组中藻细胞的最高密度明显高于对照组(p<0.05),比对照组高7.8%;A组中藻的生物产量也明显高于对照组(p<0.05),分别为0.855±0.010g/L和0.552±0.021g/L;蛭弧菌对藻细胞中的总脂肪含量和藻液中的pH值并无显著影响(p>0.05)。在球等鞭金藻的生长前期(前10天),蛭弧菌对藻液中的溶解氧含量并无明显影响,而在藻的稳定期及衰亡期,蛭弧菌添加组中藻液的溶解氧含量比对照组高。
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