第一部分缺氧对绒毛外滋养细胞株VEGFC表达的影响　　目的：研究二氯化钴（CoCl2）缺氧条件下绒毛外滋养细胞 VEGFC表达情况，探讨缺氧对绒毛外滋养细胞VEGFC表达的影响，并分析VEGFC与Maspin表达间的相关性。　　方法：　　1.采用二氯化钴（CoCl2）构建人早孕绒毛外滋养细胞株（TEV-1）化学缺氧模型。2.采用荧光定量 PCR法及 Western Blot法分别检测绒毛外滋养细胞株 VEGFC mRNA及蛋白的表达情况。　　结果：　　1.荧光定量PCR结果显示缺氧24小时，绒毛外滋养细胞株VEGFC mRNA表达明显升高，是正常对照组的2.7倍，差异具有统计学意义。　　2.Western Blot结果显示缺氧24小时，绒毛外滋养细胞株VEGFC蛋白量明显高于对照组，差异有统计学意义。　　结论：缺氧可以使绒毛外滋养细胞株中Maspin表达明显增高，同时VEGFC的表达也相应升高，两者之间的变化趋势基本一致。因此推测 VEGFC可能参与了maspin对绒毛外滋养细胞的调控。　　第二部分重组人Maspin蛋白对绒毛外滋养细胞株VEGFC表达的影响　　目的：研究常氧及缺氧时重组人Maspin蛋白对绒毛外滋养细胞株VEGFC表达的影响，探讨Maspin蛋白对绒毛外滋养细胞株VEGFC表达的调节机制。　　方法：　　1.采用二氯化钴（CoCl2）构建绒毛外滋养细胞株化学缺氧模型。　　2.常氧及缺氧条件下，利用不同浓度重组人Maspin蛋白干预绒毛外滋养细胞。　　3.采用荧光定量 PCR法 Western Blot法分别检测绒毛外滋养细胞株 VEGFC mRNA及蛋白的表达情况。　　结果：　　1.在常氧条件下，重组人Maspin蛋白干预24小时以后，随着蛋白浓度的增加绒毛外滋养细胞株 VEGFC表达明显升高，干预48小时以后绒毛外滋养细胞株VEGFC的表达未见明显变化。　　2.在缺氧条件下，重组人Maspin蛋白干预24小时后随着蛋白浓度的升高绒毛外滋养细胞株VEGFC的表达量反而逐渐降低，在48小时以后VEGFC的表达明显降低。　　结论：在常氧条件下重组人Maspin蛋白上调绒毛外滋养细胞株VEGFC的表达，在缺氧条件下重组人Maspin蛋白下调绒毛外滋养细胞株VEGFC的表达。　　第三部分脱甲基化药物对绒毛外滋养细胞株VEGFC表达的影响　　目的：研究脱甲基化药物在常氧及缺氧条件下对绒毛外滋养细胞株 VEGFC表达的影响，探讨脱甲基化药物对绒毛外滋养细胞株VEGFC表达的调节机制。　　方法：　　1.采用二氯化钴（CoCl2）构建绒毛外滋养细胞株化学缺氧模型。　　2.在常氧及缺氧条件下，利用不同浓度的脱甲基化药物干预绒毛外滋养细胞株。　　3.采用荧光定量 PCR法及 Western Blot法分别检测绒毛外滋养细胞株 VEGFC mRNA及蛋白的表达情况。　　结果：　　1.在常氧条件下脱甲基化药物干预24小时和48小时后，绒毛外滋养细胞株VEGFC的表达量随着脱甲基化药物浓度的增加，出现先升高后降低的变化，峰值分别是正常对照的5.6倍和2.6倍，都是在药物浓度为1.0μmol/L时出现。2.在缺氧条件下脱甲基化药物干预24小时和48小时后，绒毛外滋养细胞株VEGFC的表达量变化随着脱甲基化药物浓度的增加，出现先升高后降低的变化，但差异无统计学意义。　　结论：脱甲基化药物5-氮杂-2′-脱氧胞苷可以使绒毛外滋养细胞株 VEGFC的表达增加，这一效应是呈剂量依赖性的。而缺氧可以抑制5-氮杂-2′-脱氧胞苷对VEGFC表达的促进作用。　　第四部分重组人VEGFC蛋白对绒毛外滋养细胞株迁移与侵袭能力的影响　　目的：研究常氧及缺氧条件下重组人VEGFC蛋白干预后的绒毛外滋养细胞株迁移与侵袭能力变化，探讨重组人VEGFC蛋白对绒毛外滋养细胞株迁移与侵袭的调节机制。　　方法：　　1.采用二氯化钴（CoCl2）构建绒毛外滋养细胞株化学缺氧模型。　　2.在常氧及缺氧条件下，利用不同浓度的重组人VEGFC蛋白干预绒毛外滋养细胞株。　　3.利用Transwell细胞迁移与侵袭实验检测绒毛外滋养细胞株迁移与侵袭能力的变化。　　结果：　　1.在常氧条件下随着重组人VEGFC蛋白浓度升高绒毛外滋养细胞株的迁移与侵袭能力逐渐增加。　　2.在缺氧条件下随着重组人VEGFC蛋白浓度升高绒毛外滋养细胞株的侵袭能力逐渐降低，而迁移能力无明显改变。　　结论：在常氧条件下重组人 VEGFC蛋白可以促进绒毛外滋养细胞株的迁移与侵袭能力。而在缺氧条件下重组人VEGFC蛋白反而抑制绒毛外滋养细胞株的侵袭能力。