基于位点特异性PCR技术的贝母药材及藿香正气水中半夏的检测方法研究

来源 :成都中医药大学 | 被引量 : 3次 | 上传用户:zhouyongaaa
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中药材的真伪及其制剂的优劣关系着人们的用药安全,传统的鉴别方法存在一定的局限性,近年来,基于DNA的方法已被广泛用于中药的真伪鉴别,本文利用聚合酶链式反应(PCR),开展贝母药材的定性鉴别研究以及藿香正气水中半夏药材的定量研究,旨在建立中药材的快速检测方法以及中药制剂中药材的DNA定量检测方法,主要包括下列两项工作:1.建立了基于位点特异性PCR的三种鉴别方案,用于检测伊犁贝母;建立了基于位点特异性PCR的两种鉴别方案,用于检测川贝母。上述方案中,通用引物作为DNA模板的质控引物,有效地防止假阴性的误判;双重PCR体系可实现简单快速的检测;引入SYBR Green检测PCR扩增产物,达到快速检测的目的。上述检测方法能够特异性鉴别川贝母、伊犁贝母,方法准确可靠特异性强,为建立贝母多重PCR体系奠定了基础。2.建立了基于PCR的半夏水煎液中半夏药材定量检测方法。首先对几批药材样品进行了检测,证明了半夏及其混伪品的基因检测方法的可靠性与实用性;重点对半夏水煎液(制剂半成品)中半夏药材定量检测方法进行了研究,建立的普通PCR琼脂糖凝胶电泳定量法以及实时荧光定量PCR法均能实现半夏药材含量的半定量检测;最后对水半夏掺伪的藿香正气水中半夏药材的定量检测进行了探索性研究。
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