论文部分内容阅读
【目的】分析乙醛脱氢酶2(ALDH2)基因多态性和饮酒与肾结石的易感性,探索肾结石的发病的危险因素。【方法】收集广西十二家医院肾结石患者病例共2080例,健康对照4317例。其中,随机挑选肾结石患者1010例,并按照地理位置、性别、年龄等与肾结石病例相匹配的原则,挑选健康对照1010例进行ALDH2(rs671)基因检测。本研究采用上海天昊生物科技有限公司的SNPscan TM多重SNP分型试剂盒对样本ALDH2(rs671)进行分型。研究对象还包括来自防城港地区男性健康调查(FAMHES)人群的89例肾结石患者,按照年龄匹配的原则随机挑选89例健康对象作为对照纳入分析。FAMHES人群通过Illumina Omni 1平台进行全基因组关联分析(GWAS)。利用卡方检验比较两组间差异,采用多因素条件Logistic回归分析评价肾结石易感性的影响因素,比值比(OR)及95%可信限(95%CI)表示相对危险度。【结果】在肾结石患者组和健康对照组ALDH2变异基因携带者(GA+AA)分别为456(53.1%)、402(46.9%),饮酒者分别为528(54.0%)、449(46.0%),差异有统计学意义。肾结石患者组身体质量指数(BMI)、收缩压比健康对照组高(p=0.00),差异有统计学意义。ALDH2变异基因携带者患肾结石的危险性是野生基因型(AA)的1.37(1.10-1.57)倍。饮酒者患肾结石的危险性是不饮酒者的1.34(1.12-1.60)倍。在携带ALDH2变异基因(GA+AA)的个体中,饮酒者患肾结石的危险性是不饮酒者的1.31(1.00-1.72)倍。而携带ALDH2变异基因(GA+AA)且饮酒者患肾结石的危险性是携带ALDH2野生型基因(GG)且不饮酒者的1.71(1.30-2.25)倍。【结论】ALDH2基因多态性和饮酒均可增加肾结石发病的风险。携带ALDH2变异基因,尤其是饮酒的个体,患肾结石的风险增加,即ALDH2基因多态性和饮酒与肾结石易感性之间存在明显的协同作用。提示携带ALDH2变异基因者(GA+AA)不饮酒有助于降低患肾结石的危险性。【目的】利用小鼠肾结石模型分析乙醛脱氢酶(ALDH2)基因多态性和饮酒与肾结石的易感性,探索肾结石的发病的危险因素。【方法】实验动物均为8周龄大雄性ICR小鼠,其中ALDH2基因敲除型(ALDH2-/-)和野生型(ALDH2+/+)各18只。ALDH2-/-、ALDH2+/+小鼠均随机分为3组,即空白对照组、乙二醇组、饮酒组,每组6只。空白对照组给予灭菌水和普通饲料喂养;乙二醇组以0.75%乙二醇(EG)饮水和普通饲料喂养;饮酒组以0.75%EG饮水和4克食用酒精每千克小鼠体重灌胃和普通饲料喂养。造模时间共8周。造模结束,收集小鼠尿液、血液、肾脏等标本,并检测尿液中肌酐、尿酸、钙离子浓度、β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(Beta-n-acetyl amino,NAG)的活力等;检测分析血清样本中肌酐、尿酸、钙离子等浓度。一侧肾脏组织做常规石蜡切片(5μm),HE染色,在偏光显微镜下观察草酸钙结晶形态分布情况。另一侧肾脏被用于检测其4-HNE、MDA含量。各实验数据组间比较主要采用one-way ANOVA方差分析,两组间的比较采用LSD(L)检验。【结果】各组小鼠体重比较,与空白对照组和乙二醇组相比,饮酒组体重明显下降。敲除型小鼠中,饮酒组尿液肌酐水平明显比空白对照组和乙二醇组高。各组小鼠肾脏4-羟基壬烯醛和丙二醛含量比较相一致,即1、敲除型和野生型小鼠中均显示,饮酒组和乙二醇组比空白对照组高;2、在敲除型小鼠中,饮酒组明显比乙二醇组高;3、在饮酒组中,敲除型明显比野生型高。尿液中NAG活力无论是在野生型小鼠中还是在敲除型小鼠中,饮酒组均比其他各组高;各组小鼠肾脏结晶评分比较:1、敲除型和野生型小鼠中均显示,饮酒组和乙二醇组比空白对照组组高;2、在敲除型小鼠中,饮酒组明显比乙二醇组高;3、在饮酒组中,敲除型明显比野生型高。【结论】通过酒精灌胃可以使ALDH2基因敲除小鼠形成肾结石增加。给予ALDH2基因敲除型小鼠酒精灌胃发生以下改变:1、肾脏4-HNE、MDA等OS反应产物含量增加,提示肾脏ROS生成增加,导致ROS引起的氧化应激反应增强。2、尿液NAG活力增加,提示肾脏损伤增重。3、肾脏病理结晶评分上升,肾脏形成结石增加。