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试验中随机挑选健康黑白花奶牛28头,分别于未妊娠期、分娩第8天、第20天、第120天、第240天、第300天各选取3头,应用外科手术的方法采取奶牛右后侧乳区靠近乳导管根部的乳腺组织,利用HE染色、PCNA染色观察乳腺结构,用流式细胞仪检测增殖乳腺细胞;同时采抗凝血检测血浆中孕酮、雌二醇和催乳素的浓度变化;另选10头用于泌乳量测定,绘制泌乳曲线。试验数据均用SAS8.2软件统计分析。
实验结果表明:(1)在未妊娠阶段,乳腺腺泡细胞数量较少,平均为12.47个,腺泡平均直径也较小,仅17.03μm:分娩后第8天腺泡上皮细胞数量和腺泡直径增加差异均极显著(P<0.01),至分娩后第20天均达到最大值,平均值分别为34.53个和196.58μm,流式细胞仪检测乳腺胞增殖指数,出现了相似的趋势,未妊娠期最低为9.84%,分娩后第20天达最大值50.15%,之后又逐渐下降,至泌乳末期达到泌乳后的最低值;(2)PCNA检测乳腺上皮细胞增殖情况,在未妊娠期,乳腺组织处于静息状态,腺上皮PCNA阳性细胞百分率为33.38%,至分娩后第8天增加至87.55%,与未妊娠期相比差异极显著(P<0.01),此后一直持续在一个较高的水平,直至分娩后300天降至49.21%;(3)奶牛泌乳量的测定,奶牛大都在分娩后第20天达到高产期,并且一直持续到第100天左右,之后到泌乳末期一直处于缓慢下降的趋势;(4)血液中激素浓度的变化,雌二醇与孕酮呈强相关的变化趋势,催乳素在未妊娠较低,分娩后上升,至分娩后第20天达到最大值,之后到分娩后第300天逐渐下降。
结论:(1)通过研究奶牛正常乳腺上皮细胞在分娩前后的变化,发现乳腺上皮细胞在分娩后增殖活跃,并且活跃乳腺泡中的乳腺上皮一直保持高的增殖状态;(2)在整个泌乳期间,随着泌乳量的变化,乳腺上皮PCNA阳性细胞百分率和细胞增殖指数均相应的上升和下降,并且均在分娩后第20天达最大值:(3)PRL的浓度与奶牛的泌乳量正相关;(4)灰色关联度分析表明,细胞增殖指数是所检测各因素中对产奶量最大的一个影响因素。