富营养化水体中过度生长的放线菌、蓝绿藻等的代谢物如二甲基异茨醇（2-MIB）等是水体产生异味的主要元凶。为保障民众生活用水安全,2-MIB已被列为城市饮用水的必检项目。在水产养殖中,过量掺入到鱼饲料中的各种抗生素特别是毒性较大的氯霉素类抗生素也是造成水体污染的重要来源。2-MIB通常用GC-MS检测,而氯霉素类抗生素主要用LC-MS/MS检测。水样或水产品中的痕量2-MIB和氯霉素类抗生素需先用净化技术分离、富集之后才能用色谱法检测。传统的固相萃取技术（SPE）由于特异性较差,对某些特定目标物的分离富集效果并不理想,而免疫亲和净化技术（Immunoaffinity Clean-up,IAC）利用结合在固相载体上的抗体对目标物（抗原）的特异性反应,可将目标物从样品中分离富集到固相载体上,从而大大提高了净化效果。本文主要开展IAC技术对2-MIB和氯霉素类抗生素的分离富集的研究,并结合GC-MS和LC-MS/MS,分别对2-MIB和三种氯霉素类抗生素（氯霉素、氟苯尼考、甲砜霉素）进行检测。具体研究如下:1.首先对实验室已制备的抗2-MIB的单克隆抗体（mAb2-MIB）进行表征。基于该抗体所建立的检测2-MIB的酶联免疫吸附方法（ELISA）的灵敏度为52.61 ng· mL-1,远大于国家规定的2-MIB在水中的允许值（10 ng·L-1）,故该ELISA无法满足水体中2-MIB的检测要求,但该抗体仍可应用于IAC中。我们将mAb2-MIB共价偶联到CNBr活化的Sepharose 4B固相载体上,并制成IAC柱。在最佳萃取条件下,对水样中的2-MIB进行分离富集,将富集在IAC柱的目标物洗脱下来,并用GC-MS检测。与SPE净化方法相比,IAC柱的效果明显好于SPE。结果表明,结合IAC的GC-MS能有效的对水样中的2-MIB进行检测。由于mAb2-MIB的制备非常困难,目前还未见IAC-GC-MS检测水样中2-MIB的研究报道。2.氯霉素类抗生素包括氯霉素（CAP）、氟苯尼考（FF）、甲砜霉素（TAP）均已用水产养殖中,故有必要同时检测水样中的CAP、FF和TAP。我们实验室已制备出高灵敏的且仅对CAP有选择性识别的单克隆抗体（mAbCAP）。由于FF与TAP的分子结构相近,我们制备的抗FF的单克隆抗体（mAbFF,具体制备过程见第四章）能同时特异性识别FF和TAP。我们将mAbCAP和mAbFF共价偶联到CNBr活化的Sepharose 4B固相载体上,使其能与样品中三种目标物同时特异性结合。将富集在固相载体上的目标物洗脱下来,再用LC-MS/MS检测。我们考察了一定体积的固定了两种抗体的Sepharose4B对三种目标物的结合容量。与SPE净化方法相比,IAC柱的效果明显好于SPE。结果表明,IAC-LC-MS/MS能有效的对水样或水产品中三种氯霉素类抗生素同时检测。虽然IAC-LC-MS/MS用于同时检测二种氯霉素类抗生素已有报道,但IAC-LC-MS/MS用于同时检测三种氯霉素类抗生素的研究还未见报道。3.制备抗FF的单克隆抗体（mAbFF）。分别采用戊二酸酐法和碳二亚胺法将FF与牛血清白蛋白（BSA）及卵清蛋白（OVA）相联,以所合成的FF-BSA为免疫原,以杂交瘤抗体制备技术制备mAbFF;以合成的FF-OVA为包被抗原建立能对mAbFF性能进行表征的ELISA。检测FF的灵敏度3.37ng·mL-1,与TAP的CR为69.8%,而与其它类似物无交叉反应。