论文部分内容阅读
NGAL(neutrophil gelatinase-associated lipocalin)是1993年由Kjeldsen等人在中性粒细胞内首先发现的,是Lipocalin家族的成员之一。我们研究组成员在运用基因芯片技术筛选永生化食管上皮细胞系SHEE和由SHEE转化而来的食管癌细胞系SHEEC之间的差异表达基因时发现NGAL基因在SHEEC细胞中过表达,提示NGAL可能参与食管癌变的发生发展过程。近年来一些研究发现,NGAL在多种肿瘤中表达升高,但是对于NGAL在肿瘤中的表达模式仍不清楚。本研究的目的在于探讨NGAL在食管癌组织和细胞中的表达模式,这对深入研究NGAL在肿瘤发生发展过程中所发挥的功能具有重要的科学意义。 研究内容和方法: 运用免疫组化技术对包括食管正常粘膜,单纯增生,不典型增生以及食管鳞癌等81例石蜡包埋组织样品NGAL的表达情况进行检测。运用蛋白印迹、明胶酶谱以及图像分析技术对73例手术切除新鲜食管鳞癌及其对应切缘食管组织中NGAL的表达和NGAL/MMP-9复合物的活性进行了半定量分析。运用免疫荧光和蛋白印迹技术检测了5种食管癌细胞系中NGAL的表达。 研究结果: 1.在免疫组化检测中,可见正常食管上皮仅有NGAL的微弱表达,且阳性着色位于胞浆内靠近细胞膜的局限区域中。而在食管癌及食管上皮不典型增生中可见NGAL强阳性着色分布于整个细胞浆。 2.通过蛋白印迹对食管癌及其切缘相对正常食管组织中NGAL的表达进行半定量分析,确证了NGAL在食管癌组织中的表达被明显上调(P=0.030),但不同病例NGAL表达量差异较大。 3.通过蛋白印迹技术同时检测食管癌及其切缘相对正常食管组织中增殖细胞核抗原(PCNA)的表达,发现与NGAL表达之间相关性不明显(P=0.400)。 4.通过明胶酶谱技术对食管癌及其切缘相对正常食管组织中NGAL/MMP-9复合物的活性进行半定量分析,发现NGAL/MMP-9复合物活性在食管癌组织中升高非常显著(P<0.0001)。 5.通过结合临床病理资料分析,发现NGAL的表达水平与细胞的分化程度呈明显正相关(P=0.017),并且NGAL/MMP-9复合物的活性与肿瘤的浸润侵袭深度高度相关