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目的:二甲基甲酰胺(N, N-dimethylformamide, DMF)是一种低毒类的有机溶剂,是一种重要的化工原料,目前广泛应用于有机合成、石油提炼等工业行业,以及医药和其他行业。随着现代工业的发展,DMF的应用范围不断扩大,职业接触人员也不断增加,这给接触DMF的作业人群带来了健康安全隐患。本研究通过了解二甲基甲酰胺(DMF)对中国仓鼠肺细胞(V79细胞)的细胞毒性、DNA损伤作用以及细胞毒性机制,试图探讨二甲基甲酰胺可能的细胞损伤机制,为提出有效的保护职业暴露人群健康的措施提供依据。方法:(1)以体外培养V79细胞为研究对象,采用四氮唑盐比色分析法(MTT法)检测不同浓度的DMF对V79细胞作用不同时间段后,细胞存活率的变化,了解浓度-时间-毒性效应关系;(2)采用碘化吡啶(PI)染色观察细胞周期分布状况,了解DMF对V79细胞周期的影响;(3)用碱性单细胞凝胶电泳技术(SCGE)检测不同浓度DMF在作用不同时间段后,V79细胞的DNA单链断裂的损伤情况。(4)用中性单细胞凝胶电泳技术检测不同浓度DMF在作用不同时间段后,V79细胞的DNA双链断裂的情况;(5)用流式细胞术DCFH-DA法检测不同浓度DMF处理V79细胞后活性氧(ROS)含量比的变化。结果:(1) MTT结果显示,各组V79细胞存活率随染毒浓度及染毒时间的增加而下降,与阴性组比较差异均有统计学意义(P<0.05),存在明显的剂量-效应关系(6h, β=-0.002,P<0.05;12h, β=-0.003,P<0.05;24h, β=-0.003,P<0.05)。(2)流式细胞仪检测细胞周期发现,经DMF作用24h后V79细胞周期发生了明显的变化。每一染毒时间段内,随着DMF染毒浓度的增加,G1期细胞的构成比降低;而S期细胞和G2期细胞的比例则随着DMF浓度的升高而升高,各染毒组与阴性对照组比较均有差异性,差异具有统计学意义(P<0.05)。(3)碱性单细胞凝胶电泳结果显示,彗星拖尾率、尾长、Olive尾距、尾部DNA百分含量随着DMF染毒浓度的增加而增大,经SNK方差分析,各染毒浓度组和同组阴性组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。(4)中性单细胞凝胶电泳结果显示,彗星拖尾率、尾长、Olive尾距、尾部DNA百分含量随着DMF染毒浓度的增加而增大,经SNK方差分析,各染毒浓度组和同组阴性组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。(5)经流式细胞仪检测,随着DMF染毒浓度的升高,活性氧(ROS)含量相应增高并呈线性相关关系。结论:(1)DMF能够明显抑制V79细胞增殖,存在正向的剂量-效应关系,并能引起DNA损伤。(2)DMF染毒可以引起细胞周期阻滞,导致细胞凋亡。(3)低浓度的DMF0.5mmol/L染毒6h即可引起细胞单链断裂。(4)DMF染毒后可造成细胞双链断裂,导致DNA损伤。(5)DMF可引起V79细胞内活性氧含量增加。本次研究结果显示,DMF可引起体外培养的V79细胞存活率下降,通过引起DNA单双链断裂导致细胞损伤,细胞内活性氧ROS含量的增加可能是导致DNA损伤的一种机制。