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背景:白血病严重危害人类健康,诱导分化治疗白血病具有重要的现实意义。二烯丙基二硫（diallyl dissulfide,DADS）是大蒜的一种脂溶性有效成分,是一种很有开发潜力的抗肿瘤药物。我们前期工作结果显示,小剂量DADS能体内外诱导HL-60细胞分化并能增加细胞内活性氧（reactive oxygen species,ROS）的产生。我们采用蛋白质组学技术筛选出18个DADS诱导HL-60细胞分化的差异蛋白,其中内质网Ca2+结合伴侣蛋白—钙网织蛋白（calreticulin,CRT）表达明显下调。文献研究显示,CRT对肿瘤细胞的分化具有重要的调控作用,C/EBPα是粒细胞分化的重要调节者,si RNA干扰技术抑制CRT表达可促进C/EBPα的表达。目的:在前期工作的基础上,研究DADS下调calreticulin促进C/EBPα表达诱导人白血病HL-60细胞分化的作用机制。方法:收集临床外周血标本,流式细胞术（flow cytometry,FCM）检测CRT和C/EBPα在外周血白细胞中的表达情况,并研究两者的相关性;HE染色观察DADS诱导HL-60细胞分化前后的形态学改变;RT-PCR和western blot检测DADS作用HL-60细胞前后CRT和C/EBPα的表达;构建SCID小鼠成瘤模型,检测DADS对SCID小鼠成瘤等生物学行为以及对CRT和C/EBPα表达的影响;FCM检测DADS处理HL-60细胞前后细胞内ROS水平,western blot检测AKT,p-AKT,PERK,p-PERK,CRT,C/EBPα等的表达;RNA免疫共沉淀技术（RIP）研究CRT与C/EBPαmRNA的结合情况。结果:1.CRT和C/EBPα在白血病患者外周血白细胞中的表达及两者的相关性FCM结果显示,白血病人白细胞中CRT的表达高于对照组（p<0.05）,白血病人中C/EBPα的表达低于正常人（p<0.05）。各组中CRT和C/EBPα两者的表达具有相关性。2.CRT和C/EBPα在DADS诱导分化的HL-60细胞中差异表达HE染色结果显示,与对照组相比,DADS作用HL-60细胞48 h后,细胞出现明显的分化现象。DADS分别作用HL-60细胞0 h、12 h、24 h、48 h后,RT-PCR和western blot实验数据表明,随着DADS处理时间延长,CRT在mRNA水平和蛋白水平的表达呈逐渐降低的特性（p<0.05）,C/EBPα在mRNA水平和蛋白水平的表达呈逐渐升高的特性（p<0.05）。3.DADS对SCID小鼠成瘤等生物学行为以及对CRT和C/EBPα表达的影响HE染色SCID肿瘤切片,染色结果显示,经过药物处理的组织细胞出现明显的分化现象。肿瘤生长曲线显示,实验组瘤体生长速度较对照组明显减慢。与对照组相比,药物明显抑制了肿瘤的体积。21mg/kg DADS（LD DADS）,42mg/kg DADS（HD DADS）和11mg/kg ATRA组中的肿瘤抑瘤率分别为50.34%,76.34%和80.35%。Western blot实验结果表明,与对照组相比,药物处理组中CRT的表达明显降低（p<0.05）,C/EBPα的表达明显升高（p<0.05）。4.DADS通过ROS信号通路诱导CRT下调和易位细胞免疫荧光实验结果显示,DADS作用与HL-60细胞48 h后,CRT的从胞内转位至细胞膜。FCM结果显示,DADS作用于HL-60细胞0 h、12 h、24 h、48 h、72 h后,细胞中ROS的含量显著升高（p<0.05）。Western blot结果显示,与对照组相比,DADS处理细胞组和NAC+DADS处理细胞组中CRT表达显著降低,C/EBPα的表达显著升高（p<0.05）。与对照组相比,DADS处理细胞中,胞内PERK,p-PERK,AKT,p-AKT,CRT,C/EBPα等蛋白的表达产生变化（p<0.05）。5.DADS下调CRT促进C/EBPαmRNA的表达诱导HL-60细胞分化Western blot结果显示,DADS作用HL-60细胞48h后,与对照组相比,处理组细胞中CRT含量明显降低（p<0.05）。RNA免疫共沉淀实验结果显示,CRT高表达导致C/EBPαmRNA表达下调。结论:1.与对照组相比,CRT在临床白血病人外周血样本中表达上调,C/EBPα在临床白血病人中表达下调,且两者表达之间具有相关性。2.DADS可在体内外下调CRT表达,上调C/EBPα表达,诱导HL-60细胞分化。3.DADS可增加HL-60细胞中ROS的产生,并通过ROS信号通路诱导人白血病HL-60细胞分化。4.DADS下调CRT促进C/EBPαmRNA的表达诱导HL-60细胞分化。