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帕金森病(Parkinson’s Disease,简称PD)是一种影响中枢神经系统的慢性退化性疾病,主要影响患者的运动和非运动神经系统功能。目前尚未研制出完全治愈PD的方法,药物配合手术、康复、心理、护理等跨领域整合治疗能够缓解PD的部分症状,但这些治疗并不能完全消除患者的症状,且长期的使用药物往往会出现不同程度的副作用。经颅直流电刺激(Transcranial direct current stimulation t DCS),为一种近些年发展的调节大脑皮层神经元活动的非侵入性脑刺激(Non-Invasive Brain Stimulation,NIBS)技术。在过去的研究发现其可引起大脑皮层双相的、极性依赖性的改变,可引起皮质持续性兴奋或抑制,或许可以减轻帕金森病所产生的运动和非运动症状。然而,对于此模式的治疗机制目前仍处于探索阶段。本研究在t DCS应用于帕金森病的临床治疗之前,使用帕金森病动物模型并设计一系列实验方法来验证t DCS对于帕金森病可能的治疗潜力以及神经作用机制。【目的】通过动物行为学实验和黒质-纹状体区TH阳性细胞和纤维的检测探讨t DCS治疗对6-OHDA诱导的单侧偏瘫型PD大鼠的神经保护作用机制。【方法】选取16只6-OHDA诱导造模成功的雄性PD大鼠,随机分为t DCS治疗组和non-t DCS治疗组,每组8只,造模一天后开始t DCS治疗组给予持续经颅电刺激20分钟,每日1次,每周5次,持续4周。non-t DCS治疗组的大鼠没有接受任何电刺激。所有大鼠在造模前和造模后连续四周对体重、步态、旋转实验、开放场实验指标进行测量评估,在第一周和第四周进行短期记忆能力、抑郁样行为和焦虑样行为测试,两组大鼠在第四周结束后进行端头取脑,脑组织包埋、切片后进行酪氨酸羟化酶(TH)免疫组化染色,检测黑质纹状体区TH阳性细胞和纤维进行各组表达差异比较,行为学测试采用重复测量方差分析,免疫组化结果采用独立T检验进行统计学分析。【结果】1.两组大鼠在造模和t DCS治疗前后体重差异没有统计学意义(P>0.05);2.运动行为学:(1)步态参数随着时间的进展PD大鼠的步长和行走速度逐渐减少,而步宽和足部角度增加,站立和摆动阶段的步态周期也呈增加趋势;与non-t DCS治疗组相比,t DCS治疗组步行速度、步长、步宽、步态角度、各足趾长度和时间参数差异具有统计学意义(P<0.05)。(2)旋转实验与non-t DCS治疗组相比,t DCS治疗组PD大鼠旋转次数差异没有统计学意义(P>0.05);(3)Bar实验两组大鼠第二、三、四周差异具有统计学意义(P<0.05),t DCS可延缓PD大鼠前足运动功能。(4)开放场实验两组大鼠在第四周自主运动能力差异具有统计学意义(P<0.05),t DCS可改善PD大鼠自主运动能力;3.非运动行为学:(1)短期记忆能力两组PD大鼠之间差异没有统计学意义(P>0.05);(2)抑郁和焦虑样行为与non-t DCS治疗组相比,t DCS治疗组大鼠抑郁和焦虑样行为有所减轻,组间差异具有统计学意义(P<0.05);4.免疫组化:与non-t DCS治疗组相比,t DCS治疗组黒质-纹状体TH+细胞和纤维数量和密度增加,差异具有统计学意义(P<0.05)。【结论】本实验使用t DCS治疗6-OHDA诱导单侧偏瘫帕金森病大鼠模型,通过观察运动和非运动功能动物行为学检测手段以及免疫组化检测,证实t DCS可以促进帕金森病大鼠模型黑质-纹状体区TH阳性细胞数和纤维的增加,缺损的运动和非运动功能得到改善,为进一步研究t DCS神经保护作用机制提供初步实验依据。