目的：食管癌是我国最常见的十大恶性肿瘤之一，在我国其死亡率较高，居所有恶性肿瘤的第四位。虽经多年的研究，对食管癌的病因有了一定认识。食管癌的发生可能是多种因素综合作用的结果。但目前食管癌的发病率并没有显著降低。预期通过改造有害的环境和改变人们的不良饮食生活习惯，来消除或阻断致、促癌物侵入人体，是很困难的。寻找有效的化学预防途径及药物成为一项十分迫切的任务。流行病学研究发现，经常服用aspirin等非类固醇类抗炎药(nonsteroidal anti-inflammatory drugs, NSAIDs)可降低患结直肠癌、食管癌等消化道癌的危险性。NSAIDs是环氧化酶（cyclooxygenase, COX）抑制剂。因此提示COX可能在食管癌发生中具有重要作用。然而迄今为止，关于COX在食管癌发生中的作用尚不明了。为了解COX在我国食管癌高发区人群食管上皮细胞中的表达状况及其可能的作用，寻找有效的食管癌化学预防新靶点，对我省食管癌高发区人群食管上皮细胞进行了研究；COX在食管癌及癌前病变中的作用如何？COX表达与影响细胞增殖调控基因表达的相互关系如何？故此，又对取自我省肿瘤医院的食管癌标本进行了进一步研究。目前，尚未有应用国内食管癌细胞株对不同种类NSAIDs进行研究的报道。不同类型NSAIDs对食管癌细胞的生物学效应及可能的作用机制仍不清楚。为此，本研究应用aspirin、indomethacin及NS-398对3个食管癌细胞株进行了研究，探讨不同类型NSAIDs对不同食管癌细胞的生物学效应、作用的可能机制及应用NSAIDs进行化学预防的可能性，为NSAIDs在食管癌高发区人群进行化学预防提供实验依据。中国的食管癌发生具有明显的地域特征，这也为NSAIDs在食管癌高发区进行化学预防奠定了良好基础。方法：<WP=5>1 食管脱落上皮细胞的检测除对拉网获取的细胞进行涂片、巴氏染色及常规病理诊断外，运用流式细胞仪（flow cytometry, FCM）对食管拉网法获取的食管上皮细胞进行了DNA含量、DNA倍体及细胞周期分析，同时采用间接免疫荧光标记方法对上皮细胞中COX-1、COX-2、p53、p21/WAF1、p16、cyclin D1及CDK4的表达分别进行了定量检测。2 对食管鳞状细胞癌的研究食管鳞状细胞癌（squamous cell carcinoma, SCC）新鲜手术切除标本术后立即取材，以4%多聚甲醛／0.1M PBS（pH7.2）（内含0.1% DEPC）固定约3小时，常规脱水、浸蜡、包埋及切片，H.E染色，由两名有经验的病理医师分别进行组织病理学诊断。采用原位杂交方法（in situ hybridization, ISH）对COX-1、COX-2、iNOS、bcl-2 mRNA表达进行检测，并采用免疫组织化学（immunohistochemistry, IHC）方法对COX-1、bax蛋白表达进行检测。同时在相同部位取材，以70%冷乙醇固定，应用FCM对COX-1、COX-2、iNOS、bcl-2、PCNA、cyclin D1、cyclin E、CDK4及p27蛋白表达进行定量检测。利用HPIAS-1000高清晰度彩色病理图文报告分析系统进行灰度测量分析，将ISH及IHC染色结果转化为灰度值进行定量分析。3 食管鳞癌细胞培养对食管鳞癌细胞株Eca-109、TTN及TE-13进行常规培养。分别观察非类固醇类抗炎药aspirin、indomethacin及NS-398对各细胞株的作用。在倒置显微镜下观察应用3种药物后细胞的形态改变；用MTT法测定3种药物分别对3个细胞株的生长抑制情况及添加PGE2后对细胞生长的影响；采用FCM检测3种药物对癌细胞细胞周期的影响及COX-2、Bax、Bcl-2蛋白表达的变化；同时应用免疫组化对COX-2、Bax、Bcl-2的表达进行了检测；还应用放免法（RIA）对细胞培养液中PGE2的产量进行了检测；同时应用H.E染色、原位缺口末端标记技术（TUNEL法）、透射电镜及FCM法对3种药物诱导癌细胞凋亡情况进行了检测。结果：1 COX及细胞周期调控基因在食管上皮癌变进程中的表达<WP=6>食管上皮由正常细胞→异型增生→癌细胞形成进程中，DNA含量明显增加，二倍体所占百分比明显降低，异倍体率明显增高。如正常细胞组有11.9%（12/101）例为近二倍体，而无真正的异倍体，重度增生Ⅱ组26.8%（37/138）为异倍体，癌细胞组的异倍体率为88.5%。在癌变进程中，处于G0/G1期细胞明显减少而S期及G2/M期细胞明显增多，细胞增殖指数（proliferation index, PI）明显增大，在形成癌细胞时表现的尤为突出。COX-2表达随上皮细胞异型性的增高明显增加，尤其在癌细胞组中有较高表达，分别与正常组、轻增组及重增组比较差异具有显著性（P<0.05）。COX-1在各组中都有轻度表达，各组间表达无显著性差异（P>0.05）；COX-2与COX-1表达无显著相关性（r=0.145,P=0.150）。p53、cyclin D1及CDK4的表达都是随食管上皮细胞异型性的增高而明显增加，组间差异具有显著性（P<0.05）；而p16及p21/WAF1表达则随上皮细胞异型性的增高而显著减少，组间差异显著（P<0.05）。并且p16与cyclin D1表达、p21/WAF1与CDK4表达呈显著负相关（r=－0.394,P<0.001和r=－0.431,P<0.001）。2 COX及细胞周期调控基因在食管SCC中的表达（1）COX-2 mRNA表达在不同分化的SCC中表达较高，而在正常食管上皮中很低，其表达随SCC分化程度降低持续增高，各组间表达差异具有显著性（P<0.01）。COX-2 mRNA表达还与?