【摘 要】
：
原生质体融合技术是目前微生物育种的重要手段,是一种快速提高细胞表型的全基因组工程方法,广泛应用于很多领域。本研究通过原生质体融合技术对一株鸡源性罗伊氏乳杆菌（Lactobacillus reuteri）,命名为LRC,进行产芽孢育种,提高其抗逆性和过胃能力,增强益生功能,同时赋予其地衣芽孢杆菌的高产消化酶能力,为产芽孢乳酸菌育种提供可行方法并为微生态制剂生产进行优质菌株准备。本研究以LRC和地衣芽
【基金项目】
：
山西省重点研发计划项目（201803D221023-4）； 山西省研究生教育创新项目（2019SY211）；
论文部分内容阅读
原生质体融合技术是目前微生物育种的重要手段,是一种快速提高细胞表型的全基因组工程方法,广泛应用于很多领域。本研究通过原生质体融合技术对一株鸡源性罗伊氏乳杆菌（Lactobacillus reuteri）,命名为LRC,进行产芽孢育种,提高其抗逆性和过胃能力,增强益生功能,同时赋予其地衣芽孢杆菌的高产消化酶能力,为产芽孢乳酸菌育种提供可行方法并为微生态制剂生产进行优质菌株准备。本研究以LRC和地衣芽孢杆菌（Bacillus licheniformis）为亲本菌株制备原生质体,PEG-6000促融,获得了40株疑似融合子,编号为FRL1-FRL40;首先通过形态学观察、芽孢染色、产酸以及β-半乳糖苷酶试验进行表型鉴定,然后针对罗伊氏乳杆菌的gyr B基因以及地衣芽孢杆菌的16S-ITS间隔序列设计特异性引物P1/P2和P3/P4,建立融合子的双重PCR鉴定方法。鉴定结果表明,40株疑似融合子都产芽孢,其中34株产酸试验阳性,双重PCR结果表明此34株融合子均产生两条特异性条带,但其中仅有6株β-半乳糖苷酶试验呈阳性。对β-半乳糖苷酶试验阳性的6株融合子进行产消化酶能力分析:产淀粉酶能力地衣芽孢杆菌（27.11 U/m L）＞融合子（16.32 U/m L-19.05 U/m L）＞LRC（1.76 U/m L）,产胞外中性蛋白酶能力地衣芽孢杆菌（9.46 U/m L）＞融合子（3.92 U/m L-5.78 U/m L）＞LRC（2.34 U/m L）,产胞外碱性蛋白酶能力地衣芽孢杆菌（37.16 U/m L）＞融合子（25.14U/m L-31.25 U/m L）＞LRC（1.27 U/m L）。通过遗传稳定性试验获得了2株稳定性良好的融合子FRL22和FRL32。在人工模拟胃液2 h后各菌株营养体的存活率LRC（27.22%）＞FRL22（18.74%）＞FRL32（17.47%）＞地衣芽孢杆菌（11.72%）,芽孢存活率地衣芽孢杆菌（47.46%）＞FRL32（44.75%）＞FRL22（42.84%）。单菌种等量接种饲料发酵试验结果表明,在发酵过程中,LRC的活菌数持续下降;地衣芽孢杆菌、FRL22、FRL32的活菌数在发酵0～7 d持续增加并达到峰值,随后减少,但芽孢数逐渐增加;发酵14 d时饲料中的活菌数FRL32（5.82×10~8CFU/g）＞地衣芽孢杆菌（4.43×10~8CFU/g）＞FRL22（3.64×10~8CFU/g）。综上所述,本研究分离得到的鸡源性罗伊氏乳杆菌虽然过胃能力较强,但不适合饲料发酵,经过与地衣芽孢杆菌融合,进一步提高了其过胃能力,且适合饲料生料发酵,并且获得了更高的产消化酶能力。经遗传稳定性试验获得了两株产芽孢罗伊氏乳杆菌FRL22与FRL32,为以后微生态制剂的制备奠定了菌种基础。
其他文献
目的 分析小儿疝气手术护理管理中采用综合护理的价值。方法 筛选2019年1月～2021年11月入本院治疗的小儿疝气患者70例作为研究对象，并按随机数字表法分为两组，每组35例，对照组采用常规护理，观察组采用综合护理，对比两组护理效果、并发症率、康复指标、护理质量。正态计量资料采用 t 检验，计数资料采用 x~2 检验。结果 观察组的护理效果和康复指标显著优于对照组（P＜0.05）。观察组的并发症率
商业银行的良好经营对于社会经济的可持续发展具有重大意义,而绩效评价可以为商业银行的发展指明方向。城市商业银行（以下简称城商行）已经成为中国银行类金融机构的重要组成部分,研究城商行的绩效评价指标,对于城商行经营能力的提升至关重要。经济增加值（EVA）作为绩效评价指标,在计算税后净营业利润时,考虑到了营业外支出、递延所得税及减值损失等的影响,能够较为真实地反映其整体的经营绩效。近年来,贵州省经济快速发
哺乳动物黑色素细胞产生的黑色素颗粒不仅决定被毛颜色,而且还可以保护皮肤免受紫外线辐射,黑色素细胞异常可转化为黑素瘤细胞,因此,研究黑色素细胞的分子细胞生物学具有重要意义。miR-411a-3p是前期在皮肤转录组图谱中筛选到的差异表达基因,其在黑色素细胞中的功能未见报道。为了验证miR-411a-3p对羊驼黑色素颗粒的生成和转运以及对黑色素细胞的增殖和迁移的调控作用,本研究构建了miR-411a-3
为了获得适用孵化厂1日龄雏鸡批量球虫病疫苗喷滴免疫的免疫新方法,通过黏度、成膜时间、球虫卵囊沉降率、喷滴粒径大小、粘附率、采食率的测定及喷滴效果的观察评价,对鸡球虫病活疫苗喷滴稀释（简称喷滴免疫稀释剂）组方进行筛选;以相对增重率（RWG）、死亡率、肠道病变记分、每克粪便卵囊数（OPG）、病变记分减少率（RLS）、抗球虫指数（ACI）、器官病理变化等为主要检测指标,进行喷滴免疫稀释剂实验室安全性及最
为研究pCI-chIL-4-chIL-2-EGFP基因佐剂对鸡球虫疫苗免疫增效作用的机制,本试验通过检测比较使用和不使用pCI-chIL-4-chIL-2-EGFP的鸡球虫病三价四株活疫苗免疫鸡的免疫器官（胸腺、脾脏、法氏囊）和肠道（十二指肠、空肠、盲肠扁桃体）中激活的T淋巴细胞、B淋巴细胞、抗原呈递细胞数量变化及白细胞介素2（IL-2）、白细胞介素4（IL-4）、γ-干扰素（IFN-γ）和α-肿
回采工作面下煤系统和放水系统的布置需掘进大断面巷道和安设长距离大型输水管道,既延迟工作面布置周期,又不经济,运用反井钻机钻进下煤钻孔和放水钻孔代替,减少了巷道掘进量、缩短了施工时间、保障了安全、减轻了工人的劳动强度,同时降低了施工成本,更为重要的是确保了采掘接替,效果显著,取得了全面成功。
目的:猪肝小叶组织形态学参数已有研究报道,由于现代猪品种的改良,显微测量技术的改进,本研究重新测量了不同生长发育阶段猪肝小叶的直径和面积以及肝细胞和细胞核的直径,为计算机三维虚拟仿真模型提供数据参考。肝脏是维持机体血糖稳定的主要器官,肝细胞摄取葡萄糖依赖细胞膜上的葡萄糖转运蛋白。有研究报道GLUT1、GLUT2、GLUT3、GLUT5和GLUT8高表达于人和大鼠肝脏,但猪肝脏葡萄糖转运蛋白的表达研
刚地弓形虫（Toxoplasma gondii,T.gongdii）是一种专性胞内顶复门（apicomplexan）原虫,它可以侵染几乎所有的哺乳动物和鸟类。大量研究表明不同弓形虫虫株的毒力存在着差异。目前,弓形虫的分型主要依靠的是分子生物学方法。但对于大规模的弓形虫检测来说,血清学分型更加方便、快捷,而且目前的研究已经表明了弓形虫Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型可以利用一系列多态性蛋白进行血清学分型加以区分。为了建
人才是企业发展的动力，国有企业作为社会的重要细胞和国民经济的重要组成部分，更应该重视对青年人才的管理与培养，以推动新时代国有企业的高质量发展。本文结合国有企业青年人才管理与培养工作的现状，阐述了加强青年人才培养的意义，分析了国有企业青年人才管理中存在的不足，探究了青年人才管理与培养的优化策略，以期进一步提升国有企业青年人才的综合素质。