猪链球菌（Streptococcus suis，S.Suis）是一种严重危害人类健康的人兽共患性细菌，该菌可引起仔猪脑膜炎、支气管炎、败血症和关节炎等，亦可感染与猪或者猪肉制品的直接接触的人而引起化脓性关节炎、脑膜炎、心内膜炎和中毒性休克综合症等。猪链球菌感染人引起脑膜炎后最常见的愈后转归是永久性听力损失或者前庭功能障碍，给人的生活带来严重的影响。猪链球菌进入大脑引起脑膜炎的两个前提条件是菌血症的产生以及突破血脑屏障进入大脑。猪链球菌突破血脑屏障的机制目前尚未清楚，本研究旨在通过构建的猪链球菌全基因组噬菌体随机展示文库筛选出猪链球菌突破血脑屏障过程中发挥作用的成分，为进一步研究猪链球菌引发脑膜炎的致病机制奠定基础。本研究拟通过体外分离培养猪脑微血管内皮细胞和星形胶质细胞，作为构建体外血脑屏障模型的基础细胞。通过使用Transwell细胞培养皿作为基质构建体外猪血脑屏障模型。利用4h侧漏实验和HRP通透性检测试验验证血脑屏障模型的构建质量。该模型的构建为国内血脑屏障相关研究填补了空白，为研究猪病当中与血脑屏障相互作用的病原尤其是人兽共患病病原提供了基础。基于噬菌体展示技术的独特优点，构建了猪链球菌全基因组噬菌体随机展示文库，利用噬菌体随机展示文库的基因型与蛋白表型相结合的特点，利用其功能进行筛选，筛选出的阳性克隆可通过基因组测序等得出其基因序列。经过猪链球菌全基因组随机噬菌体随机展示文库与猪体外血脑屏障模型的三轮相互作用筛选，最终得到可以与组成血脑屏障模型细胞相结合以及可以内化最终改变血脑屏障通透性的噬菌体。通过对阳性噬菌体克隆的测序和比对分析，最终得到了可能参与猪链球菌破坏血脑屏障的14中蛋白分子：DNA指导的RNA聚合酶, O-乙酰高丝氨酸硫化氢解酶,胶原酶样蛋白酶,假定的膜蛋白,透明质酸酶,溶血素,转座酶IS630-Spn1,糖原磷酸化酶,烯醇化酶,信号转导组氨酸激酶, DHH家族蛋白,Phosphopantothenoylcysteine脱羧酶,纤维蛋白原结合蛋白,表面锚定蛋白。其中溶血素、烯醇化酶、纤维蛋白原结合蛋白和表面锚定蛋白与已有报道一致，均与猪链球菌致病性相关。猪链球菌突破血脑屏障存在着多种机制，筛选获得的蛋白分子在猪链球菌突破血脑屏障过程中是否发挥作用还有待于进一步证实。