毛细管电泳用于肿瘤标记物的研究

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根据世界卫生组织2004年的报告,全世界每年有1000多万新病例和600多万人死亡,全世界2000多万人经诊断患有癌症。可见癌症已经严重威胁到人类健康。当今世界各国包括发达国家,都对癌症晚期一筹莫展;但是对早期癌症病人的治疗约有80%-90%以上可以治愈率。所以肿瘤的早期诊断对于提高癌症患者的生存率具有十分重大的意义。本文以N6-甲基腺苷、1-甲基鸟苷、7-甲基鸟苷、假尿苷等四种肿瘤标记物和6-巯基嘌呤、8-氮杂鸟嘌呤等两种抗癌药为研究对象,做了以下几方面的工作: 论文的第二章及第三章中,我们采用循环伏安法(CV)、线性扫描伏安法(LSV)、微分脉冲伏安法(DPV)及恒电位库仑电解法等现代电化学技术详细研究了N6-甲基腺苷、1-甲基鸟苷在玻碳电极(GCE)上的电化学氧化行为和氧化机理。同时分别建立了简单、快速、灵敏的N6-甲基腺苷、1-甲基鸟苷微分脉冲伏安检测体系,检测限可分别达到9.8×10-8mol/L和6.6×10-8mol/L,并成功的应用于模拟尿样和血清样的检测,回收率在95.2%-102.0%之间。并用恒电位库仑电解法等详细研究了N6-甲基腺苷的电化学反应机理。 毛细管电泳技术对于物质的分离检测具有很大的优越性。第四章中我们分别以鸟苷为人体核苷的代表、以1-甲基鸟苷为修饰核苷,采用了灵敏度高的柱端喷壁式的安培检测方法对人体核苷和修饰核苷进行了同时分离检测。被测物质在0.020mol/L、pH8.2的palitzsch(Na2B4O7-H3BO3+NaCl)缓冲溶液中,在10min以内完全分离。鸟苷和1-甲基鸟苷的峰电流和待测物浓度分别在2.50×10-6~100×10-6mol/L和3.75×10-6~150×10-6mol/L范围内成良好的线性关系,检测下限(S/N=3)达0.1ppm,用于生物样品的分析,测定的回收率在97.2%~101.0%。 第五章中我们采用了应用范围广的紫外检测方法对7-甲基鸟苷、假尿苷两种肿瘤标记物和6-巯基嘌呤、8-氮杂鸟嘌呤两种抗癌药物进行了同时的分离检测。研究了缓冲体系的酸度、浓度、分离电压、进样时间以及温度等条件对分离的影响,得到了电泳的最优条件。被测物质在20mmol/L磷酸盐缓冲液(pH7.4)中,18kV的分离电压下,12分钟内得到基线分离。该法重现性好,线性范围广,同样在测定模拟尿样和模拟血清样中,四组分回收率达97.7%~103.4%,有望于用于实际样品的测定。
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