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目的:为了适应体内不同部位的组织微环境、机械压力和局部生化条件,身体演化出了三种不同的软骨类型:透明软骨(关节软骨,肋软骨,鼻中隔软骨,气管软骨环),弹性软骨(耳软骨和会厌软骨),纤维软骨(椎间盘和半月板)。由于其再生能力弱以及缺乏血供的特点,软骨的损伤是临床上缺乏有效治疗手段的棘手问题。但组织工程技术通过对软骨细胞进行体外扩增,及体内体外构建能形成新的软骨为修复这些缺损提供了可行途径。目前组织工程技术使用的支架主要有半凝固状态的凝胶和可提供一定支撑作用(PGA/PLA等)材料。虽然目前已有很多研究尝试用不同种类的软骨细胞来修复不同部位的缺损,但目前尚没有系统的研究说明,组织工程技术体外构建的组织工程软骨究竟是何种类型?体外再生软骨类型是否和起源细胞是否存在关联?软骨回植入体内后再生软骨类型是否会产生变化?软骨微环境对再生软骨类型是否具有调控作用?不同的软骨微环境调控作用是否有差异?起源细胞类型能否决定再生软骨的类型?不同起源的细胞维持自身表型的能力是否存在差异?回答这些问题不仅具有重要的科学意义,实际还存在潜在的临床意义,回答上述问题能为种子细胞的选择提供可靠的依据。方法:针对上述问题,我们选取耳软骨(弹性软骨)、关节软骨(透明软骨)和半月板(纤维软骨)作为研究对象,通过HE、Saf-O、I型胶原、II型胶原和弹性蛋白染色,首先建立正常山羊的三种不同类型软骨特征的判断标准。然后将三种不同类型的软骨细胞分别制成细胞Pluronic F127水凝胶复合物和细胞PGA材料复合物。细胞凝胶复合物组在回植前用CM-Dil进行标记,即刻回植入10只山羊的三种软骨微环境中(耳软骨、关节软骨和半月板),而细胞材料复合物在体外构建6周后,首先进行体外类型鉴定,然后回植入11只山羊的三种软骨微环境中,细胞凝胶复合物于回植1个月后取材,组织工程软骨组全部于回植6个月后取材。并过前述五中染色对再生软骨的类型进行分析。结果:体外再生软骨具有起源软骨类型的结构特征,但某些特异性蛋白表达存在偏差。在关节软骨环境中,耳软骨起源再生软骨弹性蛋白表达消失,半月板起源再生软骨基质中无纤维结构,Ⅰ型胶原表达减弱,Ⅱ型胶原表达增强,均呈透明软骨样结构。在耳软骨环境中,关节软骨起源再生软骨仍不表达弹性蛋白维持透明软骨样结构,纤维软骨细胞未能形成再生软骨。在纤维软骨环境中,耳软骨和半月板起源的再生软骨均未出现纤维样结构,Ⅰ型胶原表达弱而Ⅱ型胶原表达阳性,耳软骨起源的再生软骨不表达弹性蛋白,未向纤维软骨转化。结论:体外再生软骨具有起源软骨类型的结构特征,但某些特异性蛋白表达存在偏差,软骨微环境对再生软骨类型具有调控作用,但不同微环境调控作用存在差异,关节环境调控作用强,耳软骨和半月板微环境调控作用较弱,微环境对细胞的调控作用更强,软骨细胞对再生软骨类型具有决定作用,但不同软骨细胞决定作用存在差异,关节细胞决定作用强,耳软骨和半月板细胞决定作用较弱。