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Annexin A2(ANXA2)是一种钙依赖性膜磷脂结合蛋白,存在于生物体的多种细胞类型中。脊椎动物细胞的Annexins被命名为Annexin A家族。其中Annexin A2由339个氨基酸组成,分子量为36 kD,主要表达于内皮细胞、单核细胞及某些肿瘤细胞中,主要参与细胞膜的形成、细胞膜的转运、胞吞胞吐作用、细胞增殖活动、细胞信号转导、分化及凋亡过程以及血管生成等重要的细胞生命活动。ANXA2基因在多种肿瘤中经常上调表达,如卵巢癌。根据先前的研究结果,我们也发现ANXA2基因在高产蛋率鸡卵巢中表达上调,该结果表明ANXA2基因与禽类卵泡发育成熟相关。本研究利用荧光定量PCR技术,我们研究了ANXA2 mRNA在鸡卵巢成熟和卵泡发育过程中的表达变化,结果显示,在未开产鸡卵巢(6周龄)中ANXA2 mRNA的表达较低,随着年龄的增长,在开产鸡卵巢(23周龄)中ANXA2 mRNA的表达极显著升高(P<0.01)。本实验还收集了产蛋高峰期蛋鸡的各级卵泡,包括POF1(the first post-ovulatory follicle)、F1(the first large follicle)、F3(the third large follicle)和小白卵泡(SWF,the small white follicle),荧光定量PCR检测到不同卵泡中ANXA2 mRNA的表达情况如下:从等级前卵泡到排卵前卵泡,随着卵泡的发育,ANXA2 mRNA的表达逐渐增加(P<0.01);多次重复实验显示F1卵泡的ANXA2 mRNA表达水平最高,表明ANXA2基因很可能与参与排卵过程;POF1卵泡的ANXA2 mRNA表达水平显著下降(P<0.01),并且和SWF卵泡中的ANXA2 mRNA表达水平相当。我们分离了F1~F4卵泡的膜细胞和颗粒细胞,荧光定量PCR结果表明ANXA2 mRNA在膜细胞中的表达极显著高于颗粒细胞(P<0.01)。在卵泡膜细胞中,FSH和雌激素可促进ANXA2基因的表达,而LH和孕酮对ANXA2基因的表达无显著作用。另外,本研究进一步证明了FSH诱导ANXA2基因表达的调控区为核心启动子区。本实验还采用真核基因过表达技术研究了ANXA2基因的表达调控机制,将构建好的真核过表达载体转染到分离培养的鸡卵泡膜细胞中,结果表明,过表达膜细胞ANXA2基因可促进血管生成因子及其受体的转录表达。而且,过表达ANXA2增加了血管内皮生长因子A(VEGFA)的分泌量,促进了膜细胞的增殖。我们目前的研究不仅为ANXA2基因在鸡卵巢中的表达调控提供了首要证据,而且表明了ANXA2和卵泡血管生成有关,并有助于卵泡的发育和成功排卵。