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目的:检测Gal-8蛋白在不同状态下对种子细胞粘附性能的影响,找到一种新的方法来提高组织工程种子细胞在瓣膜支架上的粘附能力。方法:取第4代人脐静脉内皮细胞并将其分为四组:I组为重组质粒-Gal-8转染组;II组为空质粒载体转染组;III组为无处理阴性对照组;IV组为Gal-8蛋白预铺固定组。I组将Gal-8基因与质粒载体重组后转染到内皮细胞中并进行蛋白表达和基因的鉴定。II组将前一组相同空载体质粒转染入内皮细胞并进行蛋白和基因的鉴定,作为对照。III组细胞不做转染处理,只做对照。IV组细胞亦不做转染处理,其余处理见以下步骤。将上述四组细胞铺于96孔板并设置副孔,其中IV组预先将Gal-8蛋白铺设于待种植培养板,待细胞种植后30、60、90min分别于200倍显微镜下每个观察孔取10个视野检测其粘附情况并进行统计比较。将以上四组细胞分别种植于已预先脱去细胞的瓣膜支架材料上,其中IV组预先将Gal-8蛋白铺设于待种植瓣膜支架材料,观察其1周后各组的细胞生长情况并作比较。结果:转染后经Western和RT-PCR方法分别在蛋白和基因水平鉴定Gal-8,最终发现Gal-8蛋白和基因大量增加,与阴性对照组相比,结果具有统计学意义(P<0.05)。细胞种植培养板上30、60、90min后,I组(48.50±7.86,67.90±1.67,84.90±4.25个细胞/视野)相同时间内细胞粘附数量明显低于II组(79.10±6.28,90.10±5.78,118.40±8.62个细胞/视野)、III组(76.90±6.52,88.40±7.50,117.60±6.67个细胞/视野)和IV组(209.60±16.91,230.10±17.52,272.30±12.40个细胞/视野),结果具有统计学意义(P<0.05),II组相同时间细胞粘附数量与III组接近,结果无统计学意义(P>0.05),IV组相同时间细胞粘附数量较I、II、III组更高,结果具有统计学意义(P<0.05)。细胞种植于脱细胞支架材料上1周后,经HE染色及电镜观察对比发现,I组所种细胞支架材料上的细胞量最少,II组及III组细胞量相当,IV组细胞量较前三组均多,细胞生长情况良好。结论:(1)Gal-8基因转染入内皮细胞后由细胞分泌的Gal-8蛋白能抑制内皮细胞粘附于细胞外基质。(2)预先铺设固定状态下的Gal-8蛋白能促进内皮细胞粘附于胞外基质。