论文部分内容阅读
目的:4-异硫氰酸酯-2,2,6,6-四甲基哌啶氮氧自由基(4-ISO-Tempol)是一种哌啶类氮氧化合物,具有较强的抗氧化活性,在电离辐射防护和DNA损伤,预防和治疗癌症、高血压,体重控制以及心肌病的预防等方面具有很大的临床应用潜力。本文主要探讨4-ISO-Tempol对高糖条件下HBZY-1细胞的增殖调控作用及其相关机制,为临床研究提供一定的参考依据。方法:采用磺酰罗丹明B(Sulforhodamine B,SRB)法检测4-ISO-Tempol对HBZY-1细胞增殖活性的影响:采用SOD、CAT、GSH-Px、MDA检测试剂盒检测HBZY-1细胞内SOD、CAT、GSH-Px酶活力以及MDA水平;流式细胞术检测HBZY-1细胞凋亡和细胞周期;荧光探针法检测HBZY-1细胞内ROS的生成;Western blotting蛋白免疫印迹法检测HBZY-1细胞内ERK1/2、p-ERK1/2、P38、p-P38、IKK、p-IKK、Ncedherin蛋白表达。结果:实验结果表明,4-ISO-Tempol(浓度为1.25、2.5、5、10、20μg/m L)对正常条件下培养的HBZY-1细胞增殖有明显的抑制作用,作用24 h、48 h、72h抑制率分别为2.20%、8.50%、26.65%、61.23%、82.03%;3.50%、7.13%、28.87%、56.16%、80.39%;和4.07%、9.69%、31.06%、65.89%、87.91%。30mM高糖条件下HBZY-1细胞生长速度明显增快,而对正常条件下培养的HBZY-1细胞增殖无明显影响的4-ISO-Tempol(0.313、0.625、1.25、2.5μg/m L)能明显抑制高糖诱导的HBZY-1细胞生长。4-ISO-Tempol对高糖条件下HBZY-1细胞凋亡和周期的影响不明显;4-ISO-Tempol可明显提高高糖条件下HBZY-1细胞内SOD、CAT、GSH-Px酶活力,并且降低MDA含量和ROS的生成;4-ISO-Tempol抑制了高糖条件下HBZY-1细胞内p-P38、IKK、p-IKK、Ncadherin而不影响P-ERK1/2蛋白的表达。结论:4-ISO-Tempol能明显抑制高糖诱导的HBZY-1细胞增殖,其机制可能与提高细胞内抗氧化应激能力和抑制NF-κB/IKK信号通路有关。