目的在中医“天人相应”理论的指导下,通过观察摘除松果体后金黄地鼠的白介素-1(Interleukin-1,IL-1)、IL-2、IL-6、IgE、IgG、CD4+、CD8+、TNF-α 的含量在四季中的水平变化并与正常金黄地鼠进行比较,讨论金黄地鼠免疫系统各项指标的季节变化规律,探索松果体对机体免疫系统的高位调节作用和在“五脏应时”中发挥的作用,为进一步丰富“天人相应”理论的内容。方法1实验动物:实验动物为对光照敏感的健康二月龄的雄性金黄地鼠(又称叙利亚地鼠、仓鼠),将金黄地鼠分为春分、夏至、秋分、冬至4个节气组,每个节气前35天购入实验动物,按随机数字表法将金黄地鼠分为实验组(行松果体摘除术)、对照组(不作任何处理),实验组、对照组各8只,适应性饲养3天,于春分日、夏至日、秋分日、冬至日四个时间点前30天开始进行动物造模实验。造模后的金黄地鼠正常饲养至春分日、夏至日、秋分日、冬至日4个时间点,于二分二至日当晚9:00后进行动物取材实验。将金黄地鼠称量重量后在无光线的暗室5W红光灯下,麻醉后用腹主动脉取血法取血及脾脏。将血静置20分钟后置于4℃离心机中分离血清(3000r/min,20min),和脾脏并存于-80℃冰箱冷冻备用。2检测方法:用酶联免疫法(ELISA)测定金黄地鼠血清中IL-1、IL-2、IL-6、IgE、IgG 及脾脏中 IL-1、IL-2、IL-6、IgE、IgG、CD4+、CD8+、TNF-α 的含量。3数据统计及分析:实验数据采用SPSS 20.0统计学软件进行数据统计,所有数据均为计量资料,数据采用均值±标准差(x±s)表示,保留小数点后2位,实验组、对照组两组间的数据先检验是否符合正态分布,符合正态分布的数据采用独立样本的T检验来进行对比,不符合正态分布的数据采用非参数检验(2个独立样本);春分、夏至、秋分、冬至四组间的数据符合正态分布的选用单因素方差分析(one-way ANOVA)方法,组间两两比较采用LSD方法或T检验,不正态分布的数据采用非参数检验(k个独立样本)。以P<0.05为差异有统计学意义。结果1金黄地鼠血清IL-2、IL-6、IgE、IgG含量具有明显的季节性变化规律。IL-1、IL-2、IL-6、IgG含量在冬季达到最低,IL-1对照组在秋季最高,IL-6春季含量水平明显高于其他三季,IL-2在夏季的含量最高;对照组IgE的含量在春、夏、秋三季连续下降,在冬季上升,IgG的含量在春、夏、秋三季连续升高,而在冬季上降,IgE和IgG存在互补关系。2 金黄地鼠脾脏中 IL-1、IL-2、IL-6、IgE、IgG、CD4+、CD8+、TNF-α 含量具有明显的季节变化规律,整体呈现秋季高、冬季低的特点。3通过实验组和对照组间的数据对比,显示松果体参与了调控免疫系统,部分指标在被摘除松果体后失去了对照组季节变化的规律性。结论1机体免疫功能存在明显的季节性变化规律,符合“天人相应”的规律。本实验选取的血液中的免疫指标整体呈现春分夏至组水平较高、秋分冬至组水平较低的趋势,脾脏中的疫指标整体呈现秋分较高、冬至较低的趋势,说明机体的免疫功能整体存在节律性,且在冬季略有下降。这种脏腑功能随着季节变化随之产生适应性改变的现象,是“藏象应时”理论的内涵之一,也是“天人相应”理论的基本表现。2机体功能的季节性变化与松果体的高位调节作用密切相关。松果体作为机体的一种高位调节器官,在一定程度上对金黄地鼠的免疫系统起着调控作用,外界自然环境可以通过松果体来影响机体功能,并作出适应性反应,是“天人相应”过程中发挥重要调节作用的组织器官,这为松果体是“天人相应”的中介性物质提供了依据。