胸腺素β₄（Tβ₄）最初从胸腺中分离得到,是由43个氨基酸残基组成的多肽,在血小板、创面渗出液、白细胞中浓度最高,体内其它组织中也有分布。胸腺素β₄既不是生长因子,也不是细胞因子,然而它作为哺乳动物细胞内一种主要的肌动蛋白调节分子,对受损组织的再生、重塑和愈合起重要的作用。此外,研究证实Tβ₄具有多方面生物学活性,参于调节上皮形成、血管生成、抗炎等,因此可促进战创伤的愈合,并可用来治疗感染引起的内毒素性休克及伴随的多器官功能衰竭,在军事医学中具有重要意义。虽然Tβ₄有着广泛的应用前景,但由于其分子太小,难于直接在大肠杆菌中表达。目前用于实验室及临床试验的Tβ₄多为化学合成品,价格昂贵;而从哺乳动物组织中提取Tβ₄,过程复杂而且产量较低,使其应用受到限制,如何以更经济的方法获取此类多肽是本课题要解决的问题。本课题利用大肠杆菌偏爱密码子,合成人Tβ₄全长基因,结合PCR技术构建了Tβ₄的串联体基因（Tβ₄②）,将其克隆入表达载体pET-22b（+）中,重组质粒转化大肠杆菌BL21（DE3）感受态细胞,IPTG诱导表达后,经盐析、疏水作用层析和离子交换作用层析纯化重组蛋白,最终获得了高纯度的串联体蛋白Tβ₄②,并采用Western blot和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI-TOF- MS）对其进行鉴定。通过脾淋巴细胞增殖实验测定其活性,结果表明,重组Tβ₄②可促进淋巴细胞的增殖与分化,其促进淋巴细胞增殖分化的能力与化学合成品相当。此外,用纯化的Tβ₄②蛋白免疫小鼠,ELISA法无法检测到血清中含有抗Tβ₄②的抗体,为其在体内发挥生物学效应的奠定基础。我们获得了高纯度的Tβ₄②串联体蛋白,它不仅可促进淋巴细胞增殖,而且免疫原性弱,有望成为新型的战伤急救药物。