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背景和目的: 人巨细胞病毒(Human Cytomegalovirus)简称HCMV,是巨细胞包涵体病的病原体。HCMV只能在人的细胞中增殖,是一种造成全身性感染的DNA病毒。在我国人群中感染率很高,尤其是孕妇和婴幼儿,孕妇的IgG阳性率为93.57%,IgM阳性率为1.29%,婴幼儿的IgG阳性率为81.39%,IgM阳性率为6.40%,且发病有逐年增多的趋势。 我们采用ELISA、电化学发光法和实时荧光定量PCR法分别检测血清HCMV IgM、IgG特异性抗体、乳汁和尿液以及外周血单个核细胞的HCMV-DNA载量,帮助临床诊断HCMV感染,协助判断预后。 方法: 1.研究对象为2012年8月~2015年05月间在郑州大学第二附属医院就诊的孕妇777名、不孕妇女878名和儿童1478名。 2.每人留取3mL静脉血,分离血清,进行IgM和IgG抗体以及免疫球蛋白、补体、肝功能检测。另外留取3mL抗凝全血,其中1mL用于分离白细胞(PBMC),另外2mL用于外周血细胞计数和T淋巴细胞亚群测定。 儿童留取5mL尿液,3000rpm离心5min,弃上清留沉淀-20℃冷冻备用。每位母亲留取3mL乳汁,-20℃冷冻备用。采用荧光定量PCR法检测尿液和乳汁中HCMV-DNA。 3.统计学分析,所有数据分析均采用SPSS17.0数据包进行分析,四格表检验用于定性资料的差异性比较,定量资料采用t检验,数据以平均值±标准差来表示,P值<0.05为显著差异。 结果: 1.777名孕妇和878名不孕妇女HCMV IgG抗体阳性率分别为93.57%和95.45%,两者之间无显著性差异(P>0.05)。IgM抗体阳性率1.29%、3.08%,两者之间有显著性差异(P<0.05)。 2.400名原发不孕和478名继发不孕HCMV IgG阳性率为95.50%和95.40%,IgM抗体阳性率2.50%、3.56%,均无显著差异(P>0.05)。与孕妇组相比,继发不孕组IgM阳性率存在显著性差异(P<0.01)。 3.830名男孩和648名女孩HCMV IgG和IgM抗体阳性率分别为81.79%、6.39%和81.17%、6.48%,男孩和女孩比较无显著性差异(P=0.743,P=0.941)。 4.新生儿组HCMV IgG和IgM阳性率分别为83.29%和2.23%,与其他年龄组相比较均有显著性差异(P<0.05),尤其早产儿HCMV抗体阳性率更高(IgG和IgM抗体阳性率分别为94.48%、2.76%)。 5.HCMV-DNA检测,252名哺乳母亲乳汁和116名哺乳婴儿尿液的阳性率分别为47.22%和54.31%,均明显高于PBMC(阳性率1.59%、8.62%)(P=0.000)。 6.152名各年龄组儿童尿液阳性率均高于PBMC(P<0.05),其中28天-6月组尿液和PBMC HCMV-DNA阳性率最高(79.59%和18.36%),随年龄增高有逐渐减低的趋势。 7.感染HCMV的孕妇,其T细胞亚群和免疫球蛋白、补体的水平均显著低于未感染HCMV的孕妇(P<0.001)。 8.感染HCMV的儿童,其外周血细胞计数中白细胞总数、淋巴细胞比值、血小板计数均明显增高(P<0.001),红细胞总数和血红蛋白量均明显降低(P<0.001),转氨酶和胆红素的水平均显著高于未感染HCMV的儿童(P<0.001)。 结论: 1.孕妇HCMV感染率较高,与继发性不孕有关,血清学抗体阳性的哺乳母亲应定期检测乳汁中HCMV-DNA病毒载量,以防止垂直传播。 2.HCMV是儿童感染的重要病原体,原发性感染集中于哺乳期。 3.母体产生的IgG抗体不能阻止原发感染。 4.尿液HCMV-DNA检测对于儿童HCMV感染具有诊断意义。 5.免疫功能低下与孕妇感染HCMV高度相关。 6.儿童感染HCMV易导致肝功能损害、黄疸、不同程度的贫血等后果。