青莪汤对小鼠Lewis肺癌的抑制及抗转移的实验研究

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实验目的:本实验运用由四川省抗菌素工业研究所药理研究室提供的Lewis肺癌瘤株,建立可靠的Lewis市癌小鼠模型。旨在通过测定青莪汤各剂量组对Lewis肺癌的各指标的影响,探索青莪汤对Lewis肺癌的抑制及抗转移的机制。实验方法:采用lewis肺癌自传模型,50只小鼠随机,分别为肿瘤对照组,青莪汤大、中、小剂量组,CTX(环磷酰胺)组。共分5组,每组各10只。动物给药于接种Lewis肺癌后24小时,肿瘤对照组灌服等体积生理盐水(0.4ml/20g体重),每日一次,连续10天;CTX组灌服环磷酰胺(15mg/kg),每日一次,连续10天;试验组小鼠按0.9g生药/kg、2.7g生药/kg、5.4g生药/kg的剂量灌服,药液浓度分别为45mg生药/ml、135mg生药/ml和270mg生药/ml,给药体积均为0.4ml/20g体重,每日一次,连续10天。末次给药后24小时,称小鼠体重,然后颈椎脱臼处死动物,解剖出瘤块,称取瘤重,比较实验组与对照组差异,计算肿瘤抑制率;解剖出肺(福尔马林1-1.5ml灌注固定),肝、肾,投入20%福尔马林液中固定,在解剖显微镜下统计转移瘤灶后,每肺5叶、肝各叶及双肾各取组织一块,常规脱水,石蜡包埋,切片,HE染色,光镜下观察转移瘤,并计数。各组肿瘤切取1块,投入20%福尔马林液中固定,常规脱水,石蜡包埋,切片,HE染色,光镜下观察病理变化。实验结果:1、青莪汤各剂量组与环磷酰胺对小鼠lewis肺癌的抑制结果:青莪汤各剂量组(0.9、2.7、5.4g生药/kg)与肿瘤对照组比较,对Lewis肺癌细胞核分裂均有极显著抑制作用,青莪汤各剂量组抑制率分别为34-57%,环磷酰胺抑瘤率为52-60%,其数目明显少于肿瘤对照组(P<0.01或P<0.05)。青莪汤各剂量组出现显著的淋巴细胞浸润和纤维组织增生,与对照组比较,有极显著性差异(P<0.01),提示动物细胞免疫功能增强。纤维组织增生可能对肿瘤细胞的浸润过程有所延缓,限制癌细胞侵入血管内或淋巴管内,从而减少播散的机会。环磷酰胺对Lewis肺癌细胞的核分裂也有一定的抑制作用,如第一批与肿瘤对照组比较:P<0.0l,第二批与肿瘤对照组比较:P<0.05。出现的淋巴细胞浸润和纤维组织增生,与对照组比较,无显著性差异(P>0.05)。2、青莪汤对小鼠Lewis肺癌自发性肺、肝、肾转移的影响.青莪汤(0.9、2.7、5.4g生药/kg)对小鼠Lewis肺癌的肺、肝、肾转移有明显抑制作用。青莪汤大、中、小剂量组和环磷酰胺组动物肾脏均未见癌转移。青莪汤各剂量组肺转移率结果。肺转移率第1批、第2批中剂量组,第3批小剂量组,肿瘤转移率和肿瘤对照组比较有显著性差异(P<0.05);第1、2批大剂量组,以及第3批中、大剂量组与对照组比较有极显著性差异(P<0.01)。青莪汤各剂量组肝转移率结果:肝转移第1批大剂量组、第3批大、中剂量组,肿瘤转移率和对照组比较有显著性差异(P<0.05);第2批中、大剂量组与对照组比较有极显著性差异(P<0.01)。青莪汤大、中、小剂量组和环磷酰胺组动物肾脏均未见癌转移。实验结论:青莪汤各剂量组(0.9、2.7、5.4g生药/kg)对Lewis肺癌小鼠实体瘤有明显抑制作用。青莪汤各剂量组(0.9、2.7、5.4g生药/kg)对小鼠Lewis肺癌的肺、肝、肾转移有明显抑制作用,并有明显的剂量相关性,即药物剂量越大,抑制癌转移的作用越强。
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