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生物质能源的研究和开发是缓解全球能源危机,保护地球环境的重要途径。其中生物柴油是一种重要的生物质能源,因其具有可再生性和清洁无污染的特点而受到全球广泛关注。微藻因具备生长快速、含油量高、环境适应性强和易于养殖等优势,被认为是制备生物柴油的最佳原料。本文旨在建立一种基于尼罗红染色与油脂含量测定相结的富油微藻筛选体系,期望通过该体系筛选获得生物量大、油脂含量高的富油海洋微藻,并采用形态鉴定与分子鉴定相结合的技术手段,对其进行了分类鉴定,最后探究了不同营养条件对生长和油脂积累的影响,为微藻生物柴油的规模化生产奠定了基础。为了建立基于尼罗红染色与油脂含量测定相结的富油微藻筛选体系,本文首先优化尼罗红染色法,确定了最佳的染色条件：尼罗红染料浓度为1.0μg/ml、 DMSO体积分数为25%、染色时间为10min、藻液密度OD600为0.5；探究细胞破碎方法、提取溶剂比例和涡旋时间等因素对油脂提取率的影响,确定了本文最佳的油脂含量测定方法为：用匀质破碎仪(Fastprep(?)-24)破碎藻细胞,提取溶剂氯仿：甲醇：水的比列为1：1：0.9,涡旋10min。采用毛细管挑选和平板分离(涂布和划线)等方法,从12份海水样品中,获得了105株海洋微藻,其中硅藻90株,绿藻14株,红藻1株。以高含油量为目标,利用优化的尼罗红染色法对分离出的105株海洋微藻进行初步筛选,获得了33株油脂含量相对较高的微藻；采用优化的油脂含量测定法对这33株微藻进行复筛,从中获得了19株富油微藻(油脂含量大于20%),其中有5株微藻油脂含量大于30%,最高的油脂含量为38.93%。通过比较19株富油微藻的油脂产率,对其产油能力进行评价,从中获得了6株产油能力较高的富油微藻,藻株编号为XG01、YLW08、BSM01、BSM03、YPL01和YPL06,其对应的油脂产率分别为0.2219g/L、0.1858g/L、0.1839g/L、0.1588g/L、0.1327g/L和0.1237g/L。采用形态鉴定与分子鉴定相结合的技术手段,确定了富油藻株BSM01、XG01和YLW08分别为Amphora Montana、Psammodictyon panduriforme和Rhodella maculate。为了进一步提高藻株XG01(Psammodictyon panduriforme)的产油能力,采用单因子实验分别研究了氮源、磷酸盐、硅酸盐、Fe3+、海水浓度等营养条件,对其生长和油脂积累的影响,获得了藻株XG01(Psammodictyon panduriforme)高产油脂的营养条件为：培养基中氮、磷、硅和Fe3+浓度分别为300mg/L、10mg/L、20mg/L和4×10-4mol/L,在此营养条件下,藻株XG01的生物量为0.85g/L,油脂含量为48.21%,油脂产率为0.4098g/L。其中油脂产率与未优化前相比提高了1.85倍。