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目的煤矿工人是一个较特殊的职业人群,特殊的工作环境和生活方式形成了特有的疾病谱-胃十二指肠疾病,尤其是胃癌。胃癌是消化道最常见的恶性肿瘤,死亡率较高,是严重危害广大煤矿工人的一类疾病。自1983年Wallen和Mashall发现幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)以来,其与胃癌的关系日益受到人们的重视,WHO已将Hp列为一类致癌因子。Hp感染诱导一个复杂免疫反应,首先炎症细胞聚集,然后导致增生、细胞因子释放,最终导致分子改变。在被Hp上调的靶基因中,其中环氧合酶Ⅱ(COX-2)在胃癌进程中起主要作用。环氧合酶Ⅱ(COX-2)是花生四烯酸合成前列腺素的一种限酶,不仅是启动炎症反应的关键酶,而且还参与多种肿瘤的发生和发展过程。已有大量研究表明COX-2在多种肿瘤组织中呈现高表达,与胃癌等消化系统肿瘤的发生、发展和转移之间具有明显相关性。在Hp对胃癌的作用中,上调COX-2的表达水平可能是重要途径。因此检测Hp感染胃癌细胞系COX-2的表达水平,将有助于进一步明确Hp致胃癌的可能机制。本次研究通过对煤矿工人Hp菌株感染胃癌细胞系后COX-2表达水平的分析,对Hp致胃癌的发病机制作进一步的探讨,并对胃癌的防治寻找新的理论及实验依据。方法提取研究人群的胃粘膜进行Hp菌株实验室培养,培养阳性的Hp菌株来源人群职业的不同以及是否含有cagA分为煤矿工人HpCagA~+组、非煤矿工人HpCagA~+组、煤矿工人HpCagA~-组、非煤矿工人HpCagA~-组同时设立空白对照组。4组同时与胃癌细胞MKN28、MKN45、BGC823按1:100混合培养24 h,应用Western-blotting实验方法测定胃癌细胞中COX-2的表达水平。全部调查对象的调查和实验室检查数据,在反复核对无误后,用Excel建立数据库。数据应用SPSS13.0统计软件进行统计分析。结果实验室培养结果:实验室培养胃粘膜标本130份,其中进行尿素酶、过氧化氢酶、氧化酶实验证实,Hp培养阴性者85份,三项均为阳性者45份。应用PCR(聚合酶链反应)将其按照CagA基因型的有无进行分型,其中CagA~+40份,CagA~-5份。Western-blotting分析结果:胃癌细胞系与煤矿工人和非煤矿工人cagA~+或cagA~-Hp组作用24小时后COX-2的表达水平的差异无统计学意义(P>0.05),但与对照组相比COX-2的表达水平均高于对照组且差异均有统计学意义(P<0.05)。不同分化程度胃癌细胞系与HpCagA~+菌株或HpCagA~-菌株作用24小时后COX-2蛋白表达水平无统计学意义(P>0.05);但人高分化癌MKN28与cagA~+或cagA~-Hp培养24 h后,COX-2蛋白表达量均是对照组的2倍;而人低分化癌MKN45和未分化癌BGC823与cagA~+或cagA~-Hp共培养24 h后,COX-2蛋白表达量是对照组的3.6倍。结论:本研究结果表明Hp菌株与胃癌细胞作用可提高COX-2的表达水平,且表达水平和胃癌细胞的分化程度有关。