核黄素高产菌株的选育与发酵过程的优化

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我们选择高产核黄素突变株的筛选及其发酵过程的优化作为学位论文的研究课题,希望能促进我国核黄素生产技术的发展,缩短国内外差距,取得了预期的结果,其主要结果如下:选用阿氏假囊酵母Eremotheciumashbyii作为出发菌株,根据代谢控制育种理论,针对解除核黄素的前体物嘌呤生物合成途径中所受的代谢调节,选用一些结构类似物并结合亚硝基胍(NTG)诱变进行抗性筛选,获得了一株同时具有8-氮鸟嘌呤、甲硫氨酸亚砜和甘氨酸抗性的核黄素高产突变株,命名为E.ashbyiiGly-13-25,其核黄素产量(1141.61mg/L)与出发菌株E.ashbyiiA-30(776.49mg/L)相比,提高了47.0%,然后对其发酵培养条件进行优化。首先利用单次单因子法研究了各种因子:碳源,氮源,金属离子,阴离子,Mg2+浓度,装液量,接种量,种龄,玉米浆,pH值对核黄素发酵的影响,初步确定了突变株的发酵培养条件依次为:最佳碳源为糖蜜;最佳氮源为酵母膏;对产核黄素有较大促进作用的金属离子为Mn2+、Co2+、Zn2+、Cu2+并结合阴离子的影响,确定在培养基中添加MnSO4、ZnCl2、CuCl2、CoCl2四种无机盐,其浓度为4mg/L;Mg2+浓度为0.1mg/L;最佳种龄为48h;最佳接种量为5%;最佳装液量为20mL(100mL摇瓶中);添加刺激物——玉米浆,浓度为20ml/L;发酵培养基初始pH值为6.5。本研究结合菌种选育和发酵过程优化,使得菌株的核黄素发酵产量达到了一定程度的提高,但与国外先进水平相比,仍有一定的差距,有关研究仍需继续深入。
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