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背景广泛研究表明,α-突触核蛋白(α-synuclein,α-syn)在脑内黑质区细胞的自噬小体和突触内过表达及异常聚集是帕金森病病理改变的标志,这种由140个氨基酸组成的小分子酸性蛋白质普遍存在于脑部神经细胞内,在病理条件下由于结构发生改变而导致错误折叠,继而纤维化最终形成不溶的纤维状聚集体,从而诱发线粒体功能障碍、溶酶体自噬等,最终导致神经细胞出现程序性死亡。NMDA受体(N-methyl-D-aspartate receptor)的持续活化状态是帕金森病的一个主要特征。氯胺酮(Ketamine,Ket)是NMDA受体的非竞争性拮抗剂,对NMDA受体的过度活化具有抑制作用。在临床上,也观察到氯胺酮对帕金森病的运动症状有抑制效果,但是对帕金森病的典型病理改变α-syn的表达有何影响,目前尚未发现相关基础研究。目的在此项研究中,我们主要观察氯胺酮与帕金森病小鼠模型行为学及突触核蛋白α-syn表达的关系,探索氯胺酮是否对α-syn的异常表达产生影响,以及产生影响的机制。方法48只健康的雄性小鼠被随机分为3组用于本次实验,三个小组分别为对照组(NaCl组)、模型组(MPTP组)和实验组(MPTP+Ket组)。帕金森病小鼠造模,采用神经毒素1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(1-methyl-4-pheny-1,2,3,6-tetrahydropyridine,MPTP)25mg/Kg腹腔注射。首先,给予以上剂量的MPTP,再给予实验剂量的氯胺酮从腹腔注射进行干预。Rotarod experiment和gait analysis system动物行为学实验评价不同组小鼠行为学差异,免疫组化(DAB)观察小鼠脑黑质区多巴胺能神经元数目变化,免疫荧光观察小鼠黑质纹状体区α-syn表达及分布的变化,Western blot实验检测小鼠黑质纹状体区酪氨酸羟化酶(tyrosinehydroxylase,TH)、α-syn,及自噬蛋白LC3、Atg 4D、Atg 5和Beclin 1等的表达。结果在行为学实验中MPTP+Ket组改善了MPTP组发生的小鼠在转棒仪上停留圈数减少、行走步距减小的现象,说明小鼠协调能力发生了改善;免疫组化(DAB)及免疫荧光结果表明,MPTP+Ket组逆转了MPTP组小鼠脑黑质区神经元数目减少,黑质纹状体区α-syn荧光密度增加的现象;Western blot实验结果也证实,MPTP+Ket组较MPTP组小鼠黑质纹状体区TH蛋白表达增多,而α-syn表达相对减少,且小鼠纹状体区自噬相关蛋白表达相对减少。以上结果表明,氯胺酮对帕金森病小鼠具有神经保护作用。结论氯胺酮抑制了帕金森病小鼠黑质纹状体区α-syn寡聚体的水平,使纹状体区无功能自噬发生降低,减少了由于自噬小体累积所引发的神经细胞的凋亡,对MPTP诱导的神经毒性产生保护作用。