锈色棕榈象嗅觉相关基因鉴定、组织表达谱及信息素诱捕技术研究

来源 :北京林业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:tomjerry2005
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锈色棕榈象是危害棕榈科植物的重大入侵害虫之一,严重影响了我国热带生态建设和区域经济的发展。昆虫嗅觉在寄主定位、生殖活动和躲避天敌中发挥着重要作用,而嗅觉基因是昆虫嗅觉活动的分子基础。因此,对其嗅觉感受机制和诱捕技术研究有利于提高锈色棕榈象的绿色防控。本研究突破人工饲养难题,利用基因组和转录组数据鉴定出嗅觉相关基因,对其进行表达谱分析,明确了基因沉默对锈色棕榈象识别聚集信息素的影响,摸清了聚集信息素林间诱捕条件、评价了诱捕效果。主要结果如下:1.人工饲养技术。研发出半人工饲料及饲养技术,以自然寄主大王棕和甘蔗为对照,连续饲养3代,半人工饲料饲养的幼虫和蛹历期(40.20 d和33.99 d)显著低于对照组,幼虫存活率(63.87%)显著高于对照组(37.99%和48.60%),且满足锈色棕榈象生殖发育的营养需求,为后续实验提供了规模化、标准化虫源。2.嗅觉相关基因鉴定及序列分析。基于基因组数据,采用同源比对的方法共鉴定得到41个OBPs基因,11个CSPs基因,64个ORs基因,19个GRs基因,27个IRs基因,7个SNMPs基因。鉴定得到的OR、GR和IR数量均比赤拟谷盗和马铃薯甲虫基因组中鉴定到的基因数量少,表明与这两个物种相比存在明显的收缩,这可能与锈色棕榈象的寄主谱较窄有关。3.嗅觉相关基因组织表达谱分析。基于表达谱分析各基因在不同发育阶段和不同组织间的表达量,且利用聚类分析这些基因的表达特征。通过分析发现,不论是不同组织,还是不同性别间比较,高丰度表达的OBPs基因、CSPs基因、ORs基因、GRs基因、IRs基因和SNMPs基因都是触角多于其他组织,说明基因表达水平具有组织差异性。4.基因沉默对锈色棕榈象识别信息素的影响。利用RNAi技术对10个OBP、18个OR、7个SNMP基因进行沉默,经q PCR分析发现,与未处理的锈色棕榈象相比,注射ds RNA的虫体,各基因的RNAi沉默效果均较好,其表达量是对照的60%以下,效果最好的在10%左右。通过EAG和Y型嗅觉仪行为测定,发现上述基因沉默后,锈色棕榈象对聚集信息素主要成分的行为反应明显降低,表明这些基因在识别聚集信息素中起重要作用。5.聚集信息素高效诱捕技术及效果评价。比较不同诱捕器类型、颜色、高度和间距对信息素诱捕效果的影响,表明红色十字型诱捕器置于地面、间距100 m诱捕效果最佳。通过分析所诱捕到成虫的寿命和生殖能力,发现绝大多数雌成虫为产卵前期被捕获,证明信息素可大量用于锈色棕榈象野外防治。
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