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背景与目的：背景：研究表明TGFBR3在人类多种肿瘤中表达异常，其在肿瘤发生、发展中具有重要作用。本课题组前期研究显示：在膀胱癌组织中，TGFBR3表达异常，可能发挥着重要的调节作用。但其在膀胱癌细胞中的表达及其对膀胱癌生物学行为的影响还未见相关报道。目的：本实验通过检测及siRNA干扰TGFBR3在膀胱癌细胞中的表达，进而研究其对膀胱癌生物学行为的影响。方法：利用qRT-PCR及WesternBlotting检测正常膀胱上皮细胞株SV-HUC-1、膀胱癌细胞株5637及T24中TGFBR3的表达，筛选出高表达TGFBR3的细胞株。使用化学合成的siRNA干扰高表达TGFBR3的细胞株，并进行体外实验观察TGFBR3对膀胱癌生物学行为的影响。设计并合成四对特异性干扰TGFBR3的siRNA，利用qRT-PCR筛选出可以有效干扰TGFBR3mRNA达75%以上的序列，进行后续实验。应用WST-1细胞增殖实验及平板克隆形成实验研究干扰TGFBR3后膀胱癌细胞生长及活性的变化，选择PI染色法研究干扰TGFBR3后膀胱癌细胞细胞周期分布的变化，进行划痕实验及Transwell迁移、侵袭实验研究干扰TGFBR3后膀胱癌细胞运动、迁移、侵袭能力的变化。结果：本组PCR及WesternBlotting实验：无论在mRNA水平还是在蛋白水平，TGFBR3在三株细胞中的表达为：T24最高，SV-HUC-1其次，5637最低。三者mRNA表达量分别为3.420±0.0875、1.000±0.1800、0.620±0.1270(P＜0.05)。因此选用T24细胞作为后续RNAi的工具细胞。设计合成的四对siRNA-R3-1-4均可以降低T24细胞TGFBR3的表达，干扰效率分别为：85.48%、89.37%、79.83%、68.78%(P＜0.001)。因此选择siRNA-R3-1-3用于后续实验。WST-1结果显示：与Mock组、siRNA-NC组相比，转染后48h时，siRNA-TGFBR3组细胞的生长及活性降低（P＜0.01），72h时两者差异进一步增大（P＜0.001）。平板克隆形成实验结果显示：与Mock组、siRNA-NC组相比，siRNA-TGFBR3组克隆形成数明显减少（P＜0.05）。碘化丙啶染色实验结果表明：siRNA-TGFBR3组与siRNA-NC组细胞周期分布相似，未见明显sub-G1峰。划痕实验结果说明：siRNA-TGFBR3组较siRNA-NC组细胞运动能力减弱。进一步的Transwell迁移侵袭实验显示：siRNA-NC、siRNA-TGFBR3两组迁移到下室的每视野细胞数分别为258.0±12.5个、62.7±6.0个（P＜0.001），siRNA-NC、siRNA-TGFBR3两组侵袭到下室的每视野细胞数分别为158.4±20.8个、20.3±8.5个（P＜0.001）。结论:1.本实验明确显示TGFBR3在膀胱癌细胞株中的表达情况，TGFBR3在5637细胞中表达较SV-HUC-1低，而在T24细胞中较SV-HUC-1高；2.实验所用4对siRNA均可有效干扰TGFBR3的表达，其中siRNA-R3-1、2、3干扰效率在mRNA水平上达75%以上；3.siRNA干扰TGFBR3后T24细胞的细胞周期分布及凋亡无明显变化，但可以影响膀胱癌T24细胞的生长、迁移和侵袭等生物学行为。