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2,6-二硝基甲苯(2,6-DNT),英文名2,6-Dinitrotoluene,在通常条件下稳定难以降解,是一种具有较强毒性的化合物。微生物降解法,是一种有效的消除环境中污染物的方法,因其具有高效、经济、无二次污染等优点,而得以快速发展成熟。故本实验对2,6-DNT的微生物降解进行研究。分别包括活性污泥对2,6-DNT降解能力考察,单一菌种对2,6-DNT降解能力的考察和混合菌对2,6-DNT降解能力的考察,进行了详尽的研究。本文首先对污水处理厂得到的污泥进行驯化,使通过专项驯化的活性污泥具有了较强的对2,6-DNT的降解能力,同时采用均匀设计的方法筛选微生物降解2,6-DNT的条件,通过对温度、摇床转数(需氧量)、PH值条件的考察,得出最佳降解条件为,PH值7.3、温度29℃、转速129r/min,证明在此条件下2,6-DNT浓度为90mg/L、135mg/L、180mg/L时,微生物对2,6-DNT具有很高的降解能力,其96h降解率分别达到了92.2%、90.2%、85.8%。对活性污泥的菌液经过稀释后在扩大培养基中进行培养,对培养后的菌种进行观察挑选,将挑选后的菌重新接种在扩大培养基中进行培养,然后对培养后的菌种再次进行单一菌纯化,对于挑选出的单一菌进行2,6-DNT降解,对于降解后的菌液中的2,6-DNT进行定量检测,对检测的结果进行比较,结果得到降解率较高菌种3株编号分别为6.1、48N4、7.1,其降解率分别为64.58%、60.17%、70.14%。为了解具有较高降解2,6-DNT能力的菌是何种菌,对其进行菌种的鉴定,将单一菌用LB培养基进行扩增,基因组提取试剂盒步骤进行操作,以得到单一菌种的DNA提取物,将此提取物在2000bp Marka的指示下进行水平凝胶电泳实验,得出基因组提取物对于Marka的指示范围在1000bp到2000bp之间,在此条件下制定PCR的实验温度,将单一菌基因组提取物通过PCR扩增的产物进行基因检测得到其碱基序列,将此序列录入GeneBank中得到登录号为GU223217,在GeneBank基因库中将相似率为99%的10种菌的基因序列通过MEGA4.0生成进化树进行比对,可以得出该种菌均为铜绿假单胞菌。对于混合菌种,采取两两分组的方法,将经过驯化筛选得到的3株单一菌进行两两分组,得到3组混合菌液,然后通过混合菌液降解2,6-DNT,对混合菌的降解能力进行考察,采用气相色谱对降解后菌液中的2,6-DNT含量进行定量检测,得出A(6.1,48N4)混合菌的降解能力大于6.1和48N4；B(6.1,7.1)混合菌的降解能力大于6.1,小于7.1；C(6.1,48N4)混合菌的降解能力大于6.1,48N4,可以得出结果A(6.1,48N4)混合菌及C(6.1,48N4)混合菌的组成单一菌之间具有相互协同的作用,降解率分别达到了67.44%,73.45%。为了进一步解单一菌降解2,6-DNT的机制,对单一菌降解途径进行了考察,将优秀的单一菌对于2,6-DNT进行降解实验,分别在2、4、10、24、36、48、72、96、120、144、168、192h降解时进行取样,将取得的样品经过处理后通过气相色谱-质谱检测定性,可以得出其降解中间产物为2-硝基,6-氨基-甲苯,2,6-二氨基甲苯,降解途并对降解前后菌液的毒性通过MTT法进行初步考察,最终得出结果为,2,6-DNT降通过单一菌解后的毒性降低。