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背景结直肠癌(CRC)是全世界常见的消化道恶性肿瘤之一。近年来,在我国结肠癌的发病率和死亡率有明显的升高趋势,严重威胁着人们的健康。激活转录因子3(ATF3)是转录因子家族中的一员,在正常细胞中表达低,但是通过信号刺激可以诱导其在短时间内快速表达并发挥作用,也被称为是适应性反应基因。有研究表明,ATF3与多种肿瘤的发生发展有关,但ATF3对结肠癌细胞增殖和迁移及分子机制尚不完全清楚。目的探讨ATF3与结肠癌增殖和转移的关系,揭示过表达和干扰ATF3表达水平对结肠癌细胞系中Wnt/β-catenin信号通路和EMT的影响。方法1.免疫组织化学方法检测包含49例人结肠癌病理组织芯片(TMA),分析ATF3蛋白在结肠癌组织中的表达及其临床病理特征相关性。2.Western Blot检测ATF3在结肠癌细胞系中的基础表达水平,选择低表达水平的细胞转染质粒进行过表达实验,在高表达的细胞中进行干扰其表达实验。3.qRT-PCR方法检测ATF3在结肠癌细胞系中的mRNA表达水平。4.CCK-8法检测ATF3对结肠癌细胞增殖的影响。5.细胞划痕实验和Transwell观察ATF3对结肠癌细胞迁移的影响。6.Western blot检测ATF3蛋白表达,分析其对结肠癌细胞增殖和迁移的分子机制。结果1.ATF3在结肠癌组织及癌旁淋巴结中高表达率分别为42.9%、10.0%,明显低于正常结肠组织中ATF3高表达率61.2%,P<0.01。2.ATF3在HCT116细胞和HCT8细胞中表达量分别是0.41±0.05、0.53±0.10,而在SW480和RKO细胞中的表达量分别是1.25±0.12、1.69±0.10,显示ATF3在结肠癌细胞系中表达有差异,F=116.64,P<0.01。3.在细胞中转染ATF3过表达质粒,HCT116细胞和HCT8细胞48 h实验组和对照组的吸光度值分别为(1.47±0.10、1.77±0.12)、(0.43±0.09、0.64±0.07);在细胞中转染ATF3的siRNA,RKO细胞和SW480细胞48h测实验组和对照组的吸光度值分别为(1.52±0.21、0.96±0.14)、(0.61±0.10、0.40±0.07);以上实验组结果与其相应对照组比较,都有明显差异,P<0.05。4.在细胞中转染ATF3过表达质粒,HCT116细胞和HCT8细胞48 h计数实验组和对照组的穿膜细胞数分别为:(35.0±15.2、79.3±15.9)、(33.5±13.1、66.6±8.8),两两比较,P<0.01;在细胞中转染ATF3的siRNA,在RKO细胞和SW480细胞48h计数实验组和对照组的穿膜细胞数分别为:(114.8±10.2、79.6±9.4)、(35.7±7.2、15.1±7.4),两两比较,P<0.05。5.Wnt/β-catenin信号通路中,HCT116细胞和HCT8细胞中转染ATF3过表达质粒,β-catenin、GSK-3β、TCF7L2蛋白表达量;RKO细胞和SW480细胞中转染ATF3的siRNA,ATF3、β-catenin、GSK-3β、TCF7L2蛋白表达量,以上实验组结果与各自对照组相比,都有明显差异,P<0.05或P<0.01;上皮-间质转化(EMT)相关蛋白实验中,HCT116细胞和HCT8细胞转染ATF3过表达质粒,E-cadherin、N-cadherin蛋白表达量;SW480细胞中转染ATF3的siRNA,E-cadherin、N-cadherin蛋白表达量,以上实验组结果与各自对照组相比,都有明显差异,P<0.05。结论ATF3可以抑制结肠癌细胞的增殖和迁移,可能是通过调控Wnt/β-catenin信号通路和EMT,抑制了结肠癌的发生发展。