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本论文应用激光诱导荧光光谱技术,研究了肝纤维化白鼠及肝硬化患者血清的荧光光谱,通过分析肝纤维化白鼠和对照组白鼠的荧光光谱,以及健康人及肝病变患者血清自体荧光光谱,研究激光光谱技术用于肝病诊断的可能性。 文章在综述了激光光谱技术在医学诊断上应用及发展现状的基础上,使用氩离子激光器为激发光源,利用514.5nm、488.0nm和476.5nm三种波长的激发光激发白鼠(59例——健康8例;肝纤维化51例)及人(17例——健康6例:肝硬化11例)的血清得到荧光光谱。本文计算了荧光的相对强度比、半值宽度,对荧光光谱做了二阶导数,以及谱图分离等处理,对荧光光谱数据作了深入细致的分析。 白鼠与人血清荧光光谱的二阶导数光谱分析表明,在488.0nm及476.5nm的激发光作用下,在490-600nm的范围内,血清荧光光谱的二阶导数光谱在528nm(人血清出现在513nm)、553nm、587nm附近出现极小值。健康时前两个极小值的比比肝病变时要小,使用该参量区分样品时,得到约80%的符合率;对荧光光谱进行非线性高斯拟合处理,得到了相似的结果。 对人血清的荧光光谱,除进行了二阶导数分析外,还计算了相对强度比和强度为最大强度1/2倍时所对应的带宽(W1/2)。发现,488.0nm激发的荧光光谱,健康组相对强度比I500/I600的值较病变组小,健康组的带宽W1/2明显大于病变组(平均值大约大于4.2nm);激发光为476.5nm时,健康组相对强度比I490/I600的值较病变组大,健康组的带宽(W1/2)明显大于病变组(平均值大约大于4.2nm)。 文章在查阅了大量相关文献的基础上,认为肝病变时相对强度比的变化,与肝病变时血清中胆红素(荧光峰位于515nm附近)和卟啉衍生物(荧光峰位于590-630nm)的升高有关,并认为,这一光谱改变可能是肝病变时,血清荧光光谱的特征改变。在本实验的条件下,分析卟啉类衍生物荧光强度的变化以476.5nm作激发光结果较好,而研究胆红素的荧光强度变化则以488.0nm的激发光为佳,另外导数分析法是一种分析肝病变血清荧光光谱的有效方法。