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目的: 初步探讨大鼠成骨细胞膜片在不同钛表面的骨再生效应。 方法: 原代培养大鼠成骨细胞,通过形态学、HE染色、碱性磷酸酶染色和茜素红染色鉴定成骨细胞;在不同表面处理的钛片上构建大鼠成骨细胞膜片,实验分组:喷砂酸蚀组、阳极氧化组和光滑组,分别于第一周和第二周,采用物理刮取法获取成骨细胞膜片;通过倒置相差显微镜、扫描电镜对细胞膜片进行观察;HE染色测量细胞膜片的厚度;MTT法测量细胞膜片的细胞密度;微量酶标法检测细胞膜片碱性磷酸酶(ALP)活性;采用实时荧光定量PCR检测成骨细胞膜片Runx相关转录因子-2(Runx2)mRNA、骨涎蛋白(BSP)mRNA的表达,并对数据进行相应的统计分析。 结果: 倒置相差显微镜下观察原代培养细胞,细胞符合成骨细胞形态学特征,HE染色、碱性磷酸酶染色和茜素红染色鉴定结果符合成骨细胞特性。光滑组成骨细胞膜片的厚度测量:与第一周相比,第二周细胞膜片厚度明显增加(P<0.05),提示细胞膜片在钛表面增殖生长。MTT法检测:喷砂酸蚀组和阳极氧化组的细胞增殖率明显高于光滑组,细胞增殖率随时间增加而上调;喷砂-酸蚀组与阳极氧化组之间无差异。碱性磷酸酶(ALP)检测:各时间点喷砂酸蚀组和阳极氧化组碱性磷酸酶活性明显高于光滑组(P<0.05);各组第二周较第一周碱性磷酸酶活性降低(P<0.05);喷砂酸蚀组与阳极氧化组间无明显差异。实时荧光定量PCR检测:组间比较时,相对于光滑组,阳极氧化组Runx2 mRNA的表达量明显上调(第一周、第二周P<0.05),喷砂酸蚀组Runx2 mRNA的表达量比光滑组增加最明显(第一周P<0.05,第二周P<0.05)。第一周和第二周喷砂酸蚀组和阳极氧化组BSP mRNA表达量均高于光滑组,两周均具有统计学意义,其中第二周喷砂酸蚀组BSP mRNA表达量比光滑组显著增加(P<0.05)。喷砂酸蚀组与阳极氧化组间无差异。组内比较时,各组细胞膜片第二周Runx2 mRNA的表达量比第一周明显下调(P<0.05);与第一周比较,第二周BSP mRNA的表达量明显上调(P<0.05)。 结论: 成骨细胞膜片在不同处理钛表面的成骨能力有差异。在本研究条件下,与光滑钛表面相比,喷砂酸蚀和阳极氧化处理钛表面的成骨细胞膜片表现出更强的黏附、增殖、分化和矿化能力,而两者间未见明显差异,其相关机制有待进一步的研究。