论文部分内容阅读
目的：子宫内膜异位症的发生是多因素共同作用的结果，其中血管生成成为当今研究领域的新热点，异位内膜的种植、生长依赖血管生成，血管生成是子宫内膜异位症形成的关键。本课题应用基因芯片技术对参与子宫内膜异位症发生发展的相关基因进行筛选的基础上，检测与血管生成密切相关的COX-2、VEGF在组织与细胞水平的表达，探讨COX-2、VEGF在子宫内膜异位症发病机理中的作用。 方法：1、应用含有1200条基因的基因芯片，用同位素探针标记，检测子宫内膜异位症组织相关基因表达谱；2、(1)采用免疫组织化学技术检测COX-2、VEGF蛋白在32例子宫内膜异位症组织及30例正常子宫内膜中的表达，并对COX-2、VEGF的相关性进行分析；(2)应用原位杂交技术检测COX-2mRNA在子宫内膜异位症中的表达：3、体外原代培养子宫内膜细胞10例，免疫荧光染色技术检测COX-2在异位内膜细胞中的表达。第四军医大学硕士学位论文结果:1、在3例子宫内膜异位症组织与3例正常的子宫内膜组织中比较，共筛选出差异表达基因197条，表达上调基因17，其中细胞因子基因巧条，包括有致炎作用的因子:I卜1、IL--2及11了石和血管生成因子:巩刃F、户IUF、民F、只F、IL--8及新近发现的细胞因子日刃等;还有环氧合酶忍(切怜2)和咫几。2、(1)32例子宫内膜异位症患者组织中印卜2和班犯F的阳性表达率分别为别.岛和93.既，较正常内膜的表达明显增高(以0.田l)。在位子宫内膜、异位子宫内膜的印怜2和Va干在增殖期和分泌期分别为83.器、85.7%和94.4%、呱巩，差异无显著性(P为.肠)。印卜2表达与切巳干的表达呈现一定相关性(C二0.747，以0.田1)。②印卜211时叭在子宫内膜中以腺体细胞胞质表达为主，细胞核少量阳性。子宫内膜异位症组织中印卜211讨叭表达增高明显，增殖期(3.n士0.防)，分泌期(3 .05士0.41);高于正常对照组子宫内膜增殖期(0.55士0.46)，分泌期(0.57士0.43)(以a的1);子宫内膜异位症组印斧助村叭在增殖期和分泌期表达无明显差异(R幻.历)。3、体外原代培养异位子宫内膜细胞与正常子宫内膜细胞相比:(1)光学显微镜及透视电镜下观察二者在细胞学形态上无差异;(2)激光扫描共聚焦显微镜检测异位子宫内膜细胞以水佗表达明显高于正常子宫内膜细胞。结论:1.基因芯片技术能高效筛选子宫内膜异位症相关表达差异基因l盯条，17条表达上调包括细胞因子、O岌‘2基因及第四军医大学硕士学位论文由其催化合成的代毛表达。2.砚斧2、翅郎蛋白及.R叭在子宫内膜组织和细胞中均存在一定水平的表达。3Q)X esZ、V田F蛋白及椒M在子宫内膜异位症组织和细胞中表达明显上调。4.以水一2、讥不F在子宫内膜异位症组织中的表达呈相关性，且增殖期和分泌期的表达无明显差异。5.砚斧2和切欣下在子宫内膜异位症组织中参与了血管生成。